中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2009年
3期
165-170
,共6页
干细胞%支架%软骨%组织工程
榦細胞%支架%軟骨%組織工程
간세포%지가%연골%조직공정
目的 制备壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架,并与大鼠脂肪间充质干细胞复合培养,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.方法 冷冻干燥法制备壳聚糖-胶原-硫酸软骨素复合多孔海绵支架材料,采用体积法和称重法测定支架的孔隙率和吸水性,扫描电镜观察支架材料的形态结构.分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,流式细胞学检测大鼠脂肪间充质干细胞的表面标志CD29、CD34、CD44、CD45,将传至3代的细胞,以2×106/ml的密度接种于自制的壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架上.实验组为含TGF-β1的培养基,对照组无TGF-β1,培养3周后,通过免疫组织化学,RT-PCR及westenblot方法对诱导后的细胞进行鉴定.结果 制备的壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架具有合适的三维多孔结构,孔隙率为(92.23±1.68)%,孔径为100～130 μm.复合培养3周后,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色成阳性,RT-PCR结果表明有蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达,westenblot检测出Ⅱ型胶原蛋白的表达.结论 壳聚糖-胶原-硫酸软骨素复合支架材料可为脂肪间充质干细胞生长分化及组织形成提供一个良好的环境, 在软骨组织工程的支架材料领域有较广泛的应用前景.
目的 製備殼聚糖-膠原-硫痠軟骨素三維支架,併與大鼠脂肪間充質榦細胞複閤培養,探討其作為軟骨組織工程支架的可行性.方法 冷凍榦燥法製備殼聚糖-膠原-硫痠軟骨素複閤多孔海綿支架材料,採用體積法和稱重法測定支架的孔隙率和吸水性,掃描電鏡觀察支架材料的形態結構.分離培養大鼠脂肪間充質榦細胞,流式細胞學檢測大鼠脂肪間充質榦細胞的錶麵標誌CD29、CD34、CD44、CD45,將傳至3代的細胞,以2×106/ml的密度接種于自製的殼聚糖-膠原-硫痠軟骨素三維支架上.實驗組為含TGF-β1的培養基,對照組無TGF-β1,培養3週後,通過免疫組織化學,RT-PCR及westenblot方法對誘導後的細胞進行鑒定.結果 製備的殼聚糖-膠原-硫痠軟骨素三維支架具有閤適的三維多孔結構,孔隙率為(92.23±1.68)%,孔徑為100～130 μm.複閤培養3週後,Ⅱ型膠原免疫組織化學染色成暘性,RT-PCR結果錶明有蛋白聚糖和Ⅱ型膠原mRNA的錶達,westenblot檢測齣Ⅱ型膠原蛋白的錶達.結論 殼聚糖-膠原-硫痠軟骨素複閤支架材料可為脂肪間充質榦細胞生長分化及組織形成提供一箇良好的環境, 在軟骨組織工程的支架材料領域有較廣汎的應用前景.
목적 제비각취당-효원-류산연골소삼유지가,병여대서지방간충질간세포복합배양,탐토기작위연골조직공정지가적가행성.방법 냉동간조법제비각취당-효원-류산연골소복합다공해면지가재료,채용체적법화칭중법측정지가적공극솔화흡수성,소묘전경관찰지가재료적형태결구.분리배양대서지방간충질간세포,류식세포학검측대서지방간충질간세포적표면표지CD29、CD34、CD44、CD45,장전지3대적세포,이2×106/ml적밀도접충우자제적각취당-효원-류산연골소삼유지가상.실험조위함TGF-β1적배양기,대조조무TGF-β1,배양3주후,통과면역조직화학,RT-PCR급westenblot방법대유도후적세포진행감정.결과 제비적각취당-효원-류산연골소삼유지가구유합괄적삼유다공결구,공극솔위(92.23±1.68)%,공경위100～130 μm.복합배양3주후,Ⅱ형효원면역조직화학염색성양성,RT-PCR결과표명유단백취당화Ⅱ형효원mRNA적표체,westenblot검측출Ⅱ형효원단백적표체.결론 각취당-효원-류산연골소복합지가재료가위지방간충질간세포생장분화급조직형성제공일개량호적배경, 재연골조직공정적지가재료영역유교엄범적응용전경.
