海洋与湖沼
海洋與湖沼
해양여호소
OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA
2009年
1期
83-87
,共5页
微卫星%磁珠富集法%三疣梭子蟹
微衛星%磁珠富集法%三疣梭子蟹
미위성%자주부집법%삼우사자해
采用磁珠富集法,利用生物素标记的(GT)15寡核苷酸探针从三疣梭子蟹基因组DNA的Sau3A1酶切的500-1000bp片段中筛选微卫星序列.洗脱的杂交片段克隆到PMD18-T载体上构建富集微卫星基因组文库后,通过PCR筛选检测出阳性克隆进行测序.在56条测序序列中有49条非冗余序列包含有重复次数不少于5次的微卫星位点,阳性序列比例达到87.5%.其中perfect类型微卫星最大的重复次数为47次.在47条非冗余序列中,共有40条(85.1%)微卫星重复序列两端有侧翼序列能够进行引物设计.本研究中筛选的微卫星位点将为下一步的三疣梭子蟹种群遗传结构分析、经济性状的QTL定位提供遗传标记.
採用磁珠富集法,利用生物素標記的(GT)15寡覈苷痠探針從三疣梭子蟹基因組DNA的Sau3A1酶切的500-1000bp片段中篩選微衛星序列.洗脫的雜交片段剋隆到PMD18-T載體上構建富集微衛星基因組文庫後,通過PCR篩選檢測齣暘性剋隆進行測序.在56條測序序列中有49條非冗餘序列包含有重複次數不少于5次的微衛星位點,暘性序列比例達到87.5%.其中perfect類型微衛星最大的重複次數為47次.在47條非冗餘序列中,共有40條(85.1%)微衛星重複序列兩耑有側翼序列能夠進行引物設計.本研究中篩選的微衛星位點將為下一步的三疣梭子蟹種群遺傳結構分析、經濟性狀的QTL定位提供遺傳標記.
채용자주부집법,이용생물소표기적(GT)15과핵감산탐침종삼우사자해기인조DNA적Sau3A1매절적500-1000bp편단중사선미위성서렬.세탈적잡교편단극륭도PMD18-T재체상구건부집미위성기인조문고후,통과PCR사선검측출양성극륭진행측서.재56조측서서렬중유49조비용여서렬포함유중복차수불소우5차적미위성위점,양성서렬비례체도87.5%.기중perfect류형미위성최대적중복차수위47차.재47조비용여서렬중,공유40조(85.1%)미위성중복서렬량단유측익서렬능구진행인물설계.본연구중사선적미위성위점장위하일보적삼우사자해충군유전결구분석、경제성상적QTL정위제공유전표기.
