中国微创外科杂志
中國微創外科雜誌
중국미창외과잡지
CHINESE JOURNAL OF MINIMALLY INVASIVE SURGERY
2010年
5期
439-443
,共5页
何万庆%夏亚一%王海明%张超%李鹏%汪静
何萬慶%夏亞一%王海明%張超%李鵬%汪靜
하만경%하아일%왕해명%장초%리붕%왕정
成骨样细胞%细胞凋亡%流体剪切力%肿瘤坏死因子α%线粒体通路
成骨樣細胞%細胞凋亡%流體剪切力%腫瘤壞死因子α%線粒體通路
성골양세포%세포조망%류체전절력%종류배사인자α%선립체통로
目的 研究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导鼠成骨样细胞MC3T3-E1凋亡的影响.方法 将MC3T3-E1分为TNF-α干预组(实验组)和无TNF-α干预组(对照组),TNF-α(10 ng/ml)×4 h诱导MC3T3-E1凋亡后,四个实验组分别加载12 dyn/cm2 FSS作用0,15,30,60 min.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、荧光显微镜和流式细胞技术(FΑCS)检测细胞的增殖能力和凋亡,免疫印迹法检测半胱氨酸蛋白激酶9(caspase 9)和凋亡蛋白酶活化因子1(Αpaf-1)蛋白的表达.采用SPSS16.0软件包对数据进行单因素方差分析.结果 TNF-α(10 ng/ml)×4 h能诱导明显的凋亡信号,FSS(12 dyn/cm2)能明显抑制这种凋亡,而且随着刺激时间的增加,从0 min逐渐延长至60 min,细胞活性逐渐增加,凋亡细胞数逐渐减少,实验组与对照组单因素方差分析及各组间LSD两两比较有显著性差异(P＜0.05),同时caspase 9和Αpaf-1蛋白的表达也逐渐增加.结论 生理范围的FSS能够抑制TNF-α诱导的MC3T3-E1细胞的凋亡,作为线粒体通路的关键蛋白,caspase 9和Αpaf-1在凋亡时增加而FSS后表达减少,说明FSS抑制这种凋亡至少部分是减弱了凋亡的线粒体通路.
目的 研究流體剪切力(fluid shear stress,FSS)對腫瘤壞死因子α(TNF-α)誘導鼠成骨樣細胞MC3T3-E1凋亡的影響.方法 將MC3T3-E1分為TNF-α榦預組(實驗組)和無TNF-α榦預組(對照組),TNF-α(10 ng/ml)×4 h誘導MC3T3-E1凋亡後,四箇實驗組分彆加載12 dyn/cm2 FSS作用0,15,30,60 min.應用四甲基偶氮唑藍(MTT)法、熒光顯微鏡和流式細胞技術(FΑCS)檢測細胞的增殖能力和凋亡,免疫印跡法檢測半胱氨痠蛋白激酶9(caspase 9)和凋亡蛋白酶活化因子1(Αpaf-1)蛋白的錶達.採用SPSS16.0軟件包對數據進行單因素方差分析.結果 TNF-α(10 ng/ml)×4 h能誘導明顯的凋亡信號,FSS(12 dyn/cm2)能明顯抑製這種凋亡,而且隨著刺激時間的增加,從0 min逐漸延長至60 min,細胞活性逐漸增加,凋亡細胞數逐漸減少,實驗組與對照組單因素方差分析及各組間LSD兩兩比較有顯著性差異(P＜0.05),同時caspase 9和Αpaf-1蛋白的錶達也逐漸增加.結論 生理範圍的FSS能夠抑製TNF-α誘導的MC3T3-E1細胞的凋亡,作為線粒體通路的關鍵蛋白,caspase 9和Αpaf-1在凋亡時增加而FSS後錶達減少,說明FSS抑製這種凋亡至少部分是減弱瞭凋亡的線粒體通路.
목적 연구류체전절력(fluid shear stress,FSS)대종류배사인자α(TNF-α)유도서성골양세포MC3T3-E1조망적영향.방법 장MC3T3-E1분위TNF-α간예조(실험조)화무TNF-α간예조(대조조),TNF-α(10 ng/ml)×4 h유도MC3T3-E1조망후,사개실험조분별가재12 dyn/cm2 FSS작용0,15,30,60 min.응용사갑기우담서람(MTT)법、형광현미경화류식세포기술(FΑCS)검측세포적증식능력화조망,면역인적법검측반광안산단백격매9(caspase 9)화조망단백매활화인자1(Αpaf-1)단백적표체.채용SPSS16.0연건포대수거진행단인소방차분석.결과 TNF-α(10 ng/ml)×4 h능유도명현적조망신호,FSS(12 dyn/cm2)능명현억제저충조망,이차수착자격시간적증가,종0 min축점연장지60 min,세포활성축점증가,조망세포수축점감소,실험조여대조조단인소방차분석급각조간LSD량량비교유현저성차이(P＜0.05),동시caspase 9화Αpaf-1단백적표체야축점증가.결론 생리범위적FSS능구억제TNF-α유도적MC3T3-E1세포적조망,작위선립체통로적관건단백,caspase 9화Αpaf-1재조망시증가이FSS후표체감소,설명FSS억제저충조망지소부분시감약료조망적선립체통로.
