生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2010年
5期
37-40
,共4页
董美超%莫饶%尹俊梅%唐燕琼
董美超%莫饒%尹俊梅%唐燕瓊
동미초%막요%윤준매%당연경
海南龙血树%DNA提取%ISSR-PCR反应体系%优化
海南龍血樹%DNA提取%ISSR-PCR反應體繫%優化
해남룡혈수%DNA제취%ISSR-PCR반응체계%우화
目的:从海南龙血树叶片巾提取出高质量的总DNA,建立与优化海南龙血树ISSR的反应体系.方法:采用4种DNA提取方法,提取海南龙血树叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测.采用改良CTAB法提取了基因组DNA模板,对海南龙血树ISSR-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选.结果:改良CTAB法提取的DNA A260/A260在1.7～1.9之间,纯度高、杂质少、DNA完整性好.根据PCR产物的琼脂精凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为:60ng模板DNA,1.5mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,1U Taq酶,总体积为20μl.结论:改良CTAB法可以从海南龙血树叶片中提取高质最DNA,该反应体系适用于应用ISSR标记开展海南龙血树DNA指纹、遗传多样性等研究.
目的:從海南龍血樹葉片巾提取齣高質量的總DNA,建立與優化海南龍血樹ISSR的反應體繫.方法:採用4種DNA提取方法,提取海南龍血樹葉片中的總DNA,併對DNA進行紫外和電泳檢測.採用改良CTAB法提取瞭基因組DNA模闆,對海南龍血樹ISSR-PCR反應體繫中各箇主要影響因子進行瞭優化和篩選.結果:改良CTAB法提取的DNA A260/A260在1.7～1.9之間,純度高、雜質少、DNA完整性好.根據PCR產物的瓊脂精凝膠檢測結果,由試驗得到的最佳反應體繫為:60ng模闆DNA,1.5mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,1U Taq酶,總體積為20μl.結論:改良CTAB法可以從海南龍血樹葉片中提取高質最DNA,該反應體繫適用于應用ISSR標記開展海南龍血樹DNA指紋、遺傳多樣性等研究.
목적:종해남룡혈수협편건제취출고질량적총DNA,건립여우화해남룡혈수ISSR적반응체계.방법:채용4충DNA제취방법,제취해남룡혈수협편중적총DNA,병대DNA진행자외화전영검측.채용개량CTAB법제취료기인조DNA모판,대해남룡혈수ISSR-PCR반응체계중각개주요영향인자진행료우화화사선.결과:개량CTAB법제취적DNA A260/A260재1.7～1.9지간,순도고、잡질소、DNA완정성호.근거PCR산물적경지정응효검측결과,유시험득도적최가반응체계위:60ng모판DNA,1.5mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,1.0μmol/L인물,1U Taq매,총체적위20μl.결론:개량CTAB법가이종해남룡혈수협편중제취고질최DNA,해반응체계괄용우응용ISSR표기개전해남룡혈수DNA지문、유전다양성등연구.
