生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
25-27
,共3页
范美音%董安康%吴琼%陶凤云%赵伟
範美音%董安康%吳瓊%陶鳳雲%趙偉
범미음%동안강%오경%도봉운%조위
中国林蛙%核糖核酸酶%细胞毒性%原核表达
中國林蛙%覈糖覈痠酶%細胞毒性%原覈錶達
중국림와%핵당핵산매%세포독성%원핵표체
目的:利用大肠杆菌以非包涵体的形式表达中国两栖动物林蛙的细胞毒性核糖核酸酶,探索原核表达系统表达细胞毒性核糖核酸酶的条件.方法:利用中国林蛙核糖核酸酶基因及表达质粒pFlag-CTS构建重组表达质粒,转导BL21后用IPTG诱导表达,观察不同诱导温度下细菌的生长情况.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法进行重组蛋白的检测.结果:通过观察不同诱导温度下细菌的生长情况,发现利用较低温度可以降低宿主细胞对表达产物细胞毒性的敏感性,成功地得到了这种目的基因的表达产物.结论:低温(20℃)可以有效表达目的蛋白.
目的:利用大腸桿菌以非包涵體的形式錶達中國兩棲動物林蛙的細胞毒性覈糖覈痠酶,探索原覈錶達繫統錶達細胞毒性覈糖覈痠酶的條件.方法:利用中國林蛙覈糖覈痠酶基因及錶達質粒pFlag-CTS構建重組錶達質粒,轉導BL21後用IPTG誘導錶達,觀察不同誘導溫度下細菌的生長情況.利用聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡方法進行重組蛋白的檢測.結果:通過觀察不同誘導溫度下細菌的生長情況,髮現利用較低溫度可以降低宿主細胞對錶達產物細胞毒性的敏感性,成功地得到瞭這種目的基因的錶達產物.結論:低溫(20℃)可以有效錶達目的蛋白.
목적:이용대장간균이비포함체적형식표체중국량서동물림와적세포독성핵당핵산매,탐색원핵표체계통표체세포독성핵당핵산매적조건.방법:이용중국림와핵당핵산매기인급표체질립pFlag-CTS구건중조표체질립,전도BL21후용IPTG유도표체,관찰불동유도온도하세균적생장정황.이용취병희선알응효전영화면역인적방법진행중조단백적검측.결과:통과관찰불동유도온도하세균적생장정황,발현이용교저온도가이강저숙주세포대표체산물세포독성적민감성,성공지득도료저충목적기인적표체산물.결론:저온(20℃)가이유효표체목적단백.
