中国防痨杂志
中國防癆雜誌
중국방로잡지
BULLETIN OF THE CHINESE ANTITUBERCULOSIS ASSOCIATION
2010年
4期
211-216
,共6页
周舟%丁元生%刘忠华%毛翎%桂徐蔚%胡忠义
週舟%丁元生%劉忠華%毛翎%桂徐蔚%鬍忠義
주주%정원생%류충화%모령%계서위%호충의
分枝杆菌,结核%重组融合蛋白质类%抗原,细菌%干扰素Ⅱ型
分枝桿菌,結覈%重組融閤蛋白質類%抗原,細菌%榦擾素Ⅱ型
분지간균,결핵%중조융합단백질류%항원,세균%간우소Ⅱ형
目的 构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表达载体pET21a(+)中,获得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重组质粒;经表达纯化和复性后,去除内毒素,利用酶联免疫吸附试验检测48例结核病患者、30例非结核肺部疾病患者及32例健康对照者全血中IFN-γ的释放量.结果 CE21经SDS-PAGE分析后相对分子质量为45,与预期大小一致.CE21融合蛋白全血标本IFN-γ的检测,结核组阳性率为72.9%,非结核疾病对照组和健康对照组阳性率 分别为3.3%和3.1%.结论 成功获得CE21融合蛋白,IFN-γ的检测证明该融合抗原具有良好的结核病检测价值.
目的 構建結覈分枝桿菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融閤蛋白的重組質粒,通過IFN-γ的檢測探討CE21在結覈病檢測中的價值.方法 通過聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增穫得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分彆連接到pMD18-T,併將兩片段2次連接到錶達載體pET21a(+)中,穫得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重組質粒;經錶達純化和複性後,去除內毒素,利用酶聯免疫吸附試驗檢測48例結覈病患者、30例非結覈肺部疾病患者及32例健康對照者全血中IFN-γ的釋放量.結果 CE21經SDS-PAGE分析後相對分子質量為45,與預期大小一緻.CE21融閤蛋白全血標本IFN-γ的檢測,結覈組暘性率為72.9%,非結覈疾病對照組和健康對照組暘性率 分彆為3.3%和3.1%.結論 成功穫得CE21融閤蛋白,IFN-γ的檢測證明該融閤抗原具有良好的結覈病檢測價值.
목적 구건결핵분지간균CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)융합단백적중조질립,통과IFN-γ적검측탐토CE21재결핵병검측중적개치.방법 통과취합매련식반응(PCR)확증획득CFP21화CFP10-ESAT-6(CE)기인편단,분별련접도pMD18-T,병장량편단2차련접도표체재체pET21a(+)중,획득pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21중조질립;경표체순화화복성후,거제내독소,이용매련면역흡부시험검측48례결핵병환자、30례비결핵폐부질병환자급32례건강대조자전혈중IFN-γ적석방량.결과 CE21경SDS-PAGE분석후상대분자질량위45,여예기대소일치.CE21융합단백전혈표본IFN-γ적검측,결핵조양성솔위72.9%,비결핵질병대조조화건강대조조양성솔 분별위3.3%화3.1%.결론 성공획득CE21융합단백,IFN-γ적검측증명해융합항원구유량호적결핵병검측개치.
