畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
12期
1718-1723
,共6页
李长皓%金迪%王加启%赵圣国%李旦%卜登攀%周凌云
李長皓%金迪%王加啟%趙聖國%李旦%蔔登攀%週凌雲
리장호%금적%왕가계%조골국%리단%복등반%주릉운
TVA氢化细菌%分离培养%条件优化
TVA氫化細菌%分離培養%條件優化
TVA경화세균%분리배양%조건우화
本研究旨在建立奶牛瘤胃反-11-油酸(trans-11 18:1,TVA)氢化细菌体外富集和分离培养的优化条件.在厌氧培养基中添加TVA至不同终浓度(0、30、40、50、60μg·mL-1),接种瘤胃微生物后进行连续培养,每隔4h采集培养物,用于测定TVA含量及培养液OD值.另外,在厌氧培养基中添加TVA,使其终浓度为50μg·mL-1,传代培养6代收集每一代富集培养物,利用PCR-DGGE分析TVA氢化细菌种群的变化,并选取DGGE差异条带进行16S rDNA测序分析.结果,添加TVA后,连续培养至4h,培养基中TVA含量快速下降,培养至12 h,TVA浓度保持恒定.当TVA添加浓度为50和60 μμg·mL-1时,培养12 h后TVA降解率较其他浓度要高.此外,培养液OD值呈先升高后降低的趋势,且在12h达最大值.传代富集培养时,当传至第4代时,疑似TVA氢化菌种类和数量增加最显著.对差异条带的测序结果表明TVA氢化菌大多属于Lactobacillus gasseri和未培养细菌.本研究确定了奶牛瘤胃中TVA氢化细菌分离培养的适宜TVA添加量、传代时间及富集培养代数,为后续的选择性分离培养奠定了基础.
本研究旨在建立奶牛瘤胃反-11-油痠(trans-11 18:1,TVA)氫化細菌體外富集和分離培養的優化條件.在厭氧培養基中添加TVA至不同終濃度(0、30、40、50、60μg·mL-1),接種瘤胃微生物後進行連續培養,每隔4h採集培養物,用于測定TVA含量及培養液OD值.另外,在厭氧培養基中添加TVA,使其終濃度為50μg·mL-1,傳代培養6代收集每一代富集培養物,利用PCR-DGGE分析TVA氫化細菌種群的變化,併選取DGGE差異條帶進行16S rDNA測序分析.結果,添加TVA後,連續培養至4h,培養基中TVA含量快速下降,培養至12 h,TVA濃度保持恆定.噹TVA添加濃度為50和60 μμg·mL-1時,培養12 h後TVA降解率較其他濃度要高.此外,培養液OD值呈先升高後降低的趨勢,且在12h達最大值.傳代富集培養時,噹傳至第4代時,疑似TVA氫化菌種類和數量增加最顯著.對差異條帶的測序結果錶明TVA氫化菌大多屬于Lactobacillus gasseri和未培養細菌.本研究確定瞭奶牛瘤胃中TVA氫化細菌分離培養的適宜TVA添加量、傳代時間及富集培養代數,為後續的選擇性分離培養奠定瞭基礎.
본연구지재건립내우류위반-11-유산(trans-11 18:1,TVA)경화세균체외부집화분리배양적우화조건.재염양배양기중첨가TVA지불동종농도(0、30、40、50、60μg·mL-1),접충류위미생물후진행련속배양,매격4h채집배양물,용우측정TVA함량급배양액OD치.령외,재염양배양기중첨가TVA,사기종농도위50μg·mL-1,전대배양6대수집매일대부집배양물,이용PCR-DGGE분석TVA경화세균충군적변화,병선취DGGE차이조대진행16S rDNA측서분석.결과,첨가TVA후,련속배양지4h,배양기중TVA함량쾌속하강,배양지12 h,TVA농도보지항정.당TVA첨가농도위50화60 μμg·mL-1시,배양12 h후TVA강해솔교기타농도요고.차외,배양액OD치정선승고후강저적추세,차재12h체최대치.전대부집배양시,당전지제4대시,의사TVA경화균충류화수량증가최현저.대차이조대적측서결과표명TVA경화균대다속우Lactobacillus gasseri화미배양세균.본연구학정료내우류위중TVA경화세균분리배양적괄의TVA첨가량、전대시간급부집배양대수,위후속적선택성분리배양전정료기출.
