基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
3期
268-272
,共5页
刘诗兰%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
劉詩蘭%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
류시란%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
张力敏感性阳离子通道4%节律性压力波%蛋白激酶C%黏蛋白类
張力敏感性暘離子通道4%節律性壓力波%蛋白激酶C%黏蛋白類
장력민감성양리자통도4%절률성압력파%단백격매C%점단백류
目的 探讨节律性压力波维持气道黏蛋白(MUC)基础性分泌的主要信号节点.方法 采用气/液相界面法培养人气道上皮16HBE细胞,模拟正常呼吸所产生的节律性压力波作用于培养细胞,分为静态对照组、节律性压力波组、节律性压力波+张力敏感性阳离子通道( TRPV4)拮抗剂钌红、节律性压力波+维拉帕米、节律性压力波+蛋白激酶C抑制剂(GF109203x)共5组,通过激光共聚焦观察Ca2+浓度变化,RT-PCR检测TRPV4 mRNA表达,Western bolt检测MARCKS及SNAP-23水平,ELISA检测MUC(2、5AC和5B)分泌情况.结果 节律性压力波组胞内Ca2+浓度(312.34±17.08)和TRPV4 mRNA(0.63±0.03)较静态对照组(196.16±35.06,0.28±0.05)显著增高(P＜0.01),RR干预后明显降低(P＜0.01)；同时MUC(2、5AC和5B)分泌,pMARCKS及pSNAP-23蛋白水平明显增高(P＜0.01),给予Ca2+及PKC抑制剂预处理后,上述各指标蛋白均降低(P＜0.01).结论 TRPV4参与节律性压力波维持气道上皮基础性MUC分泌平衡,此过程籍以激活Ca2 +/PKC/MARCKS信号通路实现.
目的 探討節律性壓力波維持氣道黏蛋白(MUC)基礎性分泌的主要信號節點.方法 採用氣/液相界麵法培養人氣道上皮16HBE細胞,模擬正常呼吸所產生的節律性壓力波作用于培養細胞,分為靜態對照組、節律性壓力波組、節律性壓力波+張力敏感性暘離子通道( TRPV4)拮抗劑釕紅、節律性壓力波+維拉帕米、節律性壓力波+蛋白激酶C抑製劑(GF109203x)共5組,通過激光共聚焦觀察Ca2+濃度變化,RT-PCR檢測TRPV4 mRNA錶達,Western bolt檢測MARCKS及SNAP-23水平,ELISA檢測MUC(2、5AC和5B)分泌情況.結果 節律性壓力波組胞內Ca2+濃度(312.34±17.08)和TRPV4 mRNA(0.63±0.03)較靜態對照組(196.16±35.06,0.28±0.05)顯著增高(P＜0.01),RR榦預後明顯降低(P＜0.01)；同時MUC(2、5AC和5B)分泌,pMARCKS及pSNAP-23蛋白水平明顯增高(P＜0.01),給予Ca2+及PKC抑製劑預處理後,上述各指標蛋白均降低(P＜0.01).結論 TRPV4參與節律性壓力波維持氣道上皮基礎性MUC分泌平衡,此過程籍以激活Ca2 +/PKC/MARCKS信號通路實現.
목적 탐토절률성압력파유지기도점단백(MUC)기출성분비적주요신호절점.방법 채용기/액상계면법배양인기도상피16HBE세포,모의정상호흡소산생적절률성압력파작용우배양세포,분위정태대조조、절률성압력파조、절률성압력파+장력민감성양리자통도( TRPV4)길항제조홍、절률성압력파+유랍파미、절률성압력파+단백격매C억제제(GF109203x)공5조,통과격광공취초관찰Ca2+농도변화,RT-PCR검측TRPV4 mRNA표체,Western bolt검측MARCKS급SNAP-23수평,ELISA검측MUC(2、5AC화5B)분비정황.결과 절률성압력파조포내Ca2+농도(312.34±17.08)화TRPV4 mRNA(0.63±0.03)교정태대조조(196.16±35.06,0.28±0.05)현저증고(P＜0.01),RR간예후명현강저(P＜0.01)；동시MUC(2、5AC화5B)분비,pMARCKS급pSNAP-23단백수평명현증고(P＜0.01),급여Ca2+급PKC억제제예처리후,상술각지표단백균강저(P＜0.01).결론 TRPV4삼여절률성압력파유지기도상피기출성MUC분비평형,차과정적이격활Ca2 +/PKC/MARCKS신호통로실현.
