中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2004年
12期
1433-1435
,共3页
傅赞%赵翰林%王若宁%德伟%武正炎
傅讚%趙翰林%王若寧%德偉%武正炎
부찬%조한림%왕약저%덕위%무정염
抑癌基因p15%人胆管癌细胞%细胞周期
抑癌基因p15%人膽管癌細胞%細胞週期
억암기인p15%인담관암세포%세포주기
目的通过构建稳定高表达抑癌基因p15的人胆管癌细胞模型,探讨p15对胆管癌细胞增殖的影响.方法将抑癌基因p15的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体pcDNA-neo中的EcoRⅠ/XbaⅠ位点,构建成p15真核表达质粒pcDNA3p15;通过脂质体法将pcDNA3p15质粒传染人胆管癌细胞系QBC939,经G418筛选,获得稳定高表达p15的人胆管癌细胞模型及相应的表达空载体的对照细胞模型,并经Wistern分子杂交分析证实.结果与对照组相比,p15高表达的人胆管癌细胞生长速率明显下降,第4天细胞增殖结果被抑制了38.6%;克隆形成能力降低,克隆抑制率达55%;S期的细胞明显减少,G1期、G2期的细胞均有增加;癌基因c-myc蛋白水平低.结论在人胆管癌细胞中高表达抑癌基因p15抑制了细胞增殖;p15同时阻遏细胞由G1期向S期及G2期向M期转换;癌基因c-myc蛋白水平降低可能是p15抑制作用的分子机理之一.
目的通過構建穩定高錶達抑癌基因p15的人膽管癌細胞模型,探討p15對膽管癌細胞增殖的影響.方法將抑癌基因p15的cDNA構建到高效真覈錶達的質粒載體pcDNA-neo中的EcoRⅠ/XbaⅠ位點,構建成p15真覈錶達質粒pcDNA3p15;通過脂質體法將pcDNA3p15質粒傳染人膽管癌細胞繫QBC939,經G418篩選,穫得穩定高錶達p15的人膽管癌細胞模型及相應的錶達空載體的對照細胞模型,併經Wistern分子雜交分析證實.結果與對照組相比,p15高錶達的人膽管癌細胞生長速率明顯下降,第4天細胞增殖結果被抑製瞭38.6%;剋隆形成能力降低,剋隆抑製率達55%;S期的細胞明顯減少,G1期、G2期的細胞均有增加;癌基因c-myc蛋白水平低.結論在人膽管癌細胞中高錶達抑癌基因p15抑製瞭細胞增殖;p15同時阻遏細胞由G1期嚮S期及G2期嚮M期轉換;癌基因c-myc蛋白水平降低可能是p15抑製作用的分子機理之一.
목적통과구건은정고표체억암기인p15적인담관암세포모형,탐토p15대담관암세포증식적영향.방법장억암기인p15적cDNA구건도고효진핵표체적질립재체pcDNA-neo중적EcoRⅠ/XbaⅠ위점,구건성p15진핵표체질립pcDNA3p15;통과지질체법장pcDNA3p15질립전염인담관암세포계QBC939,경G418사선,획득은정고표체p15적인담관암세포모형급상응적표체공재체적대조세포모형,병경Wistern분자잡교분석증실.결과여대조조상비,p15고표체적인담관암세포생장속솔명현하강,제4천세포증식결과피억제료38.6%;극륭형성능력강저,극륭억제솔체55%;S기적세포명현감소,G1기、G2기적세포균유증가;암기인c-myc단백수평저.결론재인담관암세포중고표체억암기인p15억제료세포증식;p15동시조알세포유G1기향S기급G2기향M기전환;암기인c-myc단백수평강저가능시p15억제작용적분자궤리지일.
