生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
6期
668-673
,共6页
金维正%段瑞君%张帆%陈双燕%吴运荣%吴平
金維正%段瑞君%張帆%陳雙燕%吳運榮%吳平
금유정%단서군%장범%진쌍연%오운영%오평
水稻%Ac/Ds%无标记基因
水稻%Ac/Ds%無標記基因
수도%Ac/Ds%무표기기인
获得无选择标记转基因植株是进行重复转基因及消除转基因植株中标记基因潜在危害性的关键.实验采用了Ac/Ds转座子系统在水稻(Oryza sativa L.)中进行无hpt选择标记的转基因.将含有目的基因bar的Ds元件和hpt标记基因置于同一个T-DNA中,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) EHA105介导将Ac-T-DNA及Ds-T-DNA分别转入到不同的水稻植株,再将单拷贝的Ac-T-DNA植株与单拷贝的Ds-T-DNA植株杂交得到同时含有Ac和Ds元件的F1植株,F1自交产生F2后代,F2植株中转座后的Ds元件与T-DNA独立分离,在总共100株F2水稻植株中筛选得到2株只含有Ds元件插入而无hpt标记基因的转基因水稻植株.结果表明,利用Ac/Ds转座子系统在水稻中获得无选择标记的转基因植株是可行的.
穫得無選擇標記轉基因植株是進行重複轉基因及消除轉基因植株中標記基因潛在危害性的關鍵.實驗採用瞭Ac/Ds轉座子繫統在水稻(Oryza sativa L.)中進行無hpt選擇標記的轉基因.將含有目的基因bar的Ds元件和hpt標記基因置于同一箇T-DNA中,通過農桿菌(Agrobacterium tumefaciens) EHA105介導將Ac-T-DNA及Ds-T-DNA分彆轉入到不同的水稻植株,再將單拷貝的Ac-T-DNA植株與單拷貝的Ds-T-DNA植株雜交得到同時含有Ac和Ds元件的F1植株,F1自交產生F2後代,F2植株中轉座後的Ds元件與T-DNA獨立分離,在總共100株F2水稻植株中篩選得到2株隻含有Ds元件插入而無hpt標記基因的轉基因水稻植株.結果錶明,利用Ac/Ds轉座子繫統在水稻中穫得無選擇標記的轉基因植株是可行的.
획득무선택표기전기인식주시진행중복전기인급소제전기인식주중표기기인잠재위해성적관건.실험채용료Ac/Ds전좌자계통재수도(Oryza sativa L.)중진행무hpt선택표기적전기인.장함유목적기인bar적Ds원건화hpt표기기인치우동일개T-DNA중,통과농간균(Agrobacterium tumefaciens) EHA105개도장Ac-T-DNA급Ds-T-DNA분별전입도불동적수도식주,재장단고패적Ac-T-DNA식주여단고패적Ds-T-DNA식주잡교득도동시함유Ac화Ds원건적F1식주,F1자교산생F2후대,F2식주중전좌후적Ds원건여T-DNA독립분리,재총공100주F2수도식주중사선득도2주지함유Ds원건삽입이무hpt표기기인적전기인수도식주.결과표명,이용Ac/Ds전좌자계통재수도중획득무선택표기적전기인식주시가행적.
