中国口腔颌面外科杂志
中國口腔頜麵外科雜誌
중국구강합면외과잡지
CHINA JOURNAL OF ORAL AND MAXILLOFACIAL SURGERY
2004年
1期
26-30
,共5页
曹俊%蒋欣泉%潘红芽%蔡殿才%周晓健%陈万涛%张志愿
曹俊%蔣訢泉%潘紅芽%蔡殿纔%週曉健%陳萬濤%張誌願
조준%장흔천%반홍아%채전재%주효건%진만도%장지원
核酶%乳头状瘤病毒%转化%上皮,口腔
覈酶%乳頭狀瘤病毒%轉化%上皮,口腔
핵매%유두상류병독%전화%상피,구강
目的:探讨发夹状核酶阻断人乳头状瘤病毒16(HPV16)转化口腔上皮细胞的能力及可能的机制.方法:设计合成HPV16 E6特异性发夹状核酶基因;构建重组真核表达载体;脂质体介导转染HPV16诱导的永生化口腔上皮细胞(HIOEC);空白载体对照;潮霉素筛选;斑点杂交检测细胞中核酶的表达;PCR、RT-PCR和免疫细胞化学分别检测细胞中HPV16 E6的DNA、RNA和蛋白表达;荧光染色、流式细胞仪检测、生长曲线绘制观察细胞生物学特性的改变.结果:成功构建含HPV16 E6特异性发夹状核酶的重组真核表达载体pcDNA-RZE6;转导筛选后,获得阳性克隆HIOEC-RZE6和空白载体对照HIOEC-pcDNA;HIOEC-RZE6中核酶转录、HPV16 E6RNA和蛋白表达下降,细胞增殖减缓,出现凋亡;HIOEC-pcDNA中未见同样变化.结论:HPV16 E6特异性发夹状核酶可以抑制HPV16 E6表达,并阻断HIOEC进一步恶变,诱导细胞凋亡.
目的:探討髮夾狀覈酶阻斷人乳頭狀瘤病毒16(HPV16)轉化口腔上皮細胞的能力及可能的機製.方法:設計閤成HPV16 E6特異性髮夾狀覈酶基因;構建重組真覈錶達載體;脂質體介導轉染HPV16誘導的永生化口腔上皮細胞(HIOEC);空白載體對照;潮黴素篩選;斑點雜交檢測細胞中覈酶的錶達;PCR、RT-PCR和免疫細胞化學分彆檢測細胞中HPV16 E6的DNA、RNA和蛋白錶達;熒光染色、流式細胞儀檢測、生長麯線繪製觀察細胞生物學特性的改變.結果:成功構建含HPV16 E6特異性髮夾狀覈酶的重組真覈錶達載體pcDNA-RZE6;轉導篩選後,穫得暘性剋隆HIOEC-RZE6和空白載體對照HIOEC-pcDNA;HIOEC-RZE6中覈酶轉錄、HPV16 E6RNA和蛋白錶達下降,細胞增殖減緩,齣現凋亡;HIOEC-pcDNA中未見同樣變化.結論:HPV16 E6特異性髮夾狀覈酶可以抑製HPV16 E6錶達,併阻斷HIOEC進一步噁變,誘導細胞凋亡.
목적:탐토발협상핵매조단인유두상류병독16(HPV16)전화구강상피세포적능력급가능적궤제.방법:설계합성HPV16 E6특이성발협상핵매기인;구건중조진핵표체재체;지질체개도전염HPV16유도적영생화구강상피세포(HIOEC);공백재체대조;조매소사선;반점잡교검측세포중핵매적표체;PCR、RT-PCR화면역세포화학분별검측세포중HPV16 E6적DNA、RNA화단백표체;형광염색、류식세포의검측、생장곡선회제관찰세포생물학특성적개변.결과:성공구건함HPV16 E6특이성발협상핵매적중조진핵표체재체pcDNA-RZE6;전도사선후,획득양성극륭HIOEC-RZE6화공백재체대조HIOEC-pcDNA;HIOEC-RZE6중핵매전록、HPV16 E6RNA화단백표체하강,세포증식감완,출현조망;HIOEC-pcDNA중미견동양변화.결론:HPV16 E6특이성발협상핵매가이억제HPV16 E6표체,병조단HIOEC진일보악변,유도세포조망.
