肿瘤防治杂志
腫瘤防治雜誌
종류방치잡지
CHINA JOURNAL OF CANCER PREVENTION AND TREATMENT
2001年
5期
456-460
,共5页
熊华淇%许丽艳%蔡唯佳%沈忠英%徐小虎%李恩民
熊華淇%許麗豔%蔡唯佳%瀋忠英%徐小虎%李恩民
웅화기%허려염%채유가%침충영%서소호%리은민
嗜中性粒细胞明胶酶相关lipocalin%cDNA克隆%食管癌细胞系%表达载体构建
嗜中性粒細胞明膠酶相關lipocalin%cDNA剋隆%食管癌細胞繫%錶達載體構建
기중성립세포명효매상관lipocalin%cDNA극륭%식관암세포계%표체재체구건
目的:克隆NGAL基因的cDNA,并构建其表达载体.方法:应用RT-PCR技术,从食管癌细胞系SHEEC中扩增出NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)基因的cDNA,并重组到中间载体pT-Adv中,经测序和与NCBI数据库比较证实是NGAL基因的全编序列.然后把它分别插入到真核表达载体pcDNA 3和原核表达载体pGEX-4T-3中.结果:获得了NGAL基因的cDNA全序列,构建了NGAL的正、反向真核表达载体pcDNA-NGAL(+/-)和原核表达载体pGEX-NGAL,并在大肠埃希菌TOP10F＇中成功地表达出NGAL融合蛋白.结论:为研究NGAL基因的新功能和制备其抗体,进而阐明NGAL在食管癌等肿瘤中的生物学作用提供了有利工具.
目的:剋隆NGAL基因的cDNA,併構建其錶達載體.方法:應用RT-PCR技術,從食管癌細胞繫SHEEC中擴增齣NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)基因的cDNA,併重組到中間載體pT-Adv中,經測序和與NCBI數據庫比較證實是NGAL基因的全編序列.然後把它分彆插入到真覈錶達載體pcDNA 3和原覈錶達載體pGEX-4T-3中.結果:穫得瞭NGAL基因的cDNA全序列,構建瞭NGAL的正、反嚮真覈錶達載體pcDNA-NGAL(+/-)和原覈錶達載體pGEX-NGAL,併在大腸埃希菌TOP10F＇中成功地錶達齣NGAL融閤蛋白.結論:為研究NGAL基因的新功能和製備其抗體,進而闡明NGAL在食管癌等腫瘤中的生物學作用提供瞭有利工具.
목적:극륭NGAL기인적cDNA,병구건기표체재체.방법:응용RT-PCR기술,종식관암세포계SHEEC중확증출NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)기인적cDNA,병중조도중간재체pT-Adv중,경측서화여NCBI수거고비교증실시NGAL기인적전편서렬.연후파타분별삽입도진핵표체재체pcDNA 3화원핵표체재체pGEX-4T-3중.결과:획득료NGAL기인적cDNA전서렬,구건료NGAL적정、반향진핵표체재체pcDNA-NGAL(+/-)화원핵표체재체pGEX-NGAL,병재대장애희균TOP10F＇중성공지표체출NGAL융합단백.결론:위연구NGAL기인적신공능화제비기항체,진이천명NGAL재식관암등종류중적생물학작용제공료유리공구.
