中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2009年
5期
594-597
,共4页
丁家波%张存帅%彭小兵%蒋颖%程君生%张尔利%蒋玉文%毛开荣
丁傢波%張存帥%彭小兵%蔣穎%程君生%張爾利%蔣玉文%毛開榮
정가파%장존수%팽소병%장영%정군생%장이리%장옥문%모개영
布鲁菌%BCSP31基因%IS711基因%多重PCR
佈魯菌%BCSP31基因%IS711基因%多重PCR
포로균%BCSP31기인%IS711기인%다중PCR
用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法.用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178 bp 3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178 bp 3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178 bp 2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178 bp 3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178 bp 3条带.均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何务带.结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查.
用BCSP31作為佈魯菌屬特異性基因,以IS711基因拷貝數差異作為佈魯菌種間特異性標誌,建立瞭佈魯菌種屬特異性的多重PCR鑒定方法.用建立的多重PCR方法對11株(牛種A19,A544,A387;羊種M111,M28,M16;犬種RM6/66;綿羊種63/290;豬種S2,rS2,S1330)不同種來源的佈魯菌菌體和基因組進行鑒定,結果牛種菌能擴增大小分彆為494,223,178 bp 3條帶,羊種菌能擴增齣大小分彆為733,223,178 bp 3條帶,犬種菌能擴增齣大小分彆為223,178 bp 2條帶,綿羊種菌能擴增齣大小分彆為976,223,178 bp 3條帶,豬種菌能擴增齣大小分彆為285,223,178 bp 3條帶.均與預期一緻;而作為對照的大腸桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、流產沙門菌和都柏林沙門菌,均未擴增齣任何務帶.結果錶明,本研究所建立的方法具有良好的特異性,能夠區分不同種源的佈魯菌,可用于佈魯菌種屬的快速鑒定和流行病學調查.
용BCSP31작위포로균속특이성기인,이IS711기인고패수차이작위포로균충간특이성표지,건립료포로균충속특이성적다중PCR감정방법.용건립적다중PCR방법대11주(우충A19,A544,A387;양충M111,M28,M16;견충RM6/66;면양충63/290;저충S2,rS2,S1330)불동충래원적포로균균체화기인조진행감정,결과우충균능확증대소분별위494,223,178 bp 3조대,양충균능확증출대소분별위733,223,178 bp 3조대,견충균능확증출대소분별위223,178 bp 2조대,면양충균능확증출대소분별위976,223,178 bp 3조대,저충균능확증출대소분별위285,223,178 bp 3조대.균여예기일치;이작위대조적대장간균、흉막폐염방선간균、다살성파씨간균、유산사문균화도백림사문균,균미확증출임하무대.결과표명,본연구소건립적방법구유량호적특이성,능구구분불동충원적포로균,가용우포로균충속적쾌속감정화류행병학조사.
