哈萨克族食管癌中survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体
합살극족식관암중survivin기인계동자구CpG도급전기인공구건진핵표체재체
Construction of survivin gene and promoter CpG island of Hazak's esophageal cancer in Eukaryotic Expression Vector
  • 万方数据
    新疆医科大学学报 신강의과대학학보
    JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY
    2010年 7期 739-742 ,共4页

    刘玲%张丽萍%陈艳%李卉%姜孝芳%李秀梅%谌宏鸣%赵学信%李惠武

    류령%장려평%진염%리훼%강효방%리수매%심굉명%조학신%리혜무

    survivin%启动子区%哈萨克族食管癌%载体构建 survivin%啟動子區%哈薩剋族食管癌%載體構建
    survivin%계동자구%합살극족식관암%재체구건
    目的 构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响.方法 采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DNA扩增出survivin基因启动子区CpG岛,survivin基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌E.coli ER1793中扩增.经测序正确后,将重组质粒及survivin基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入E.coli ER1793中扩增.将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果.结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的survivin基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中.转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白.结论 成功构建真核表达载体,为进一步探讨survivin基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础.
    목적 구건survivin기인계동자구CpG도급전기인공구건진핵표체재체,연구survivin기인계동자구적갑기화상태대해기인표체급공능적영향.방법 채용PCR방법종신강합살극족식관암적cDNA표체양성적표본중확증출survivin기인,이양성조직기인조DNA확증출survivin기인계동자구CpG도,survivin기인경쌍매절후여진핵표체재체pEGFP-N1상련,병전입갑기화매결함적대장간균E.coli ER1793중확증.경측서정학후,장중조질립급survivin기인계동자구CpG도용HindⅢ매절,련접후재차전입E.coli ER1793중확증.장중조질립전염지식관암세포주Eca-109중,형광현미경관찰결과.결과 DNA측서증명획득료포함ORF전장적survivin기인급기계동자구CpG도,병장쌍서렬성공극륭입진핵표체재체pEGFP-N1중.전염후형광현미경하관찰도록색형광단백.결론 성공구건진핵표체재체,위진일보탐토survivin기인계동자구CpG도갑기화상태대해기인재합살극족식관암세포주중적표체급공능적영향전정료기출.
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