临床内科杂志
臨床內科雜誌
림상내과잡지
JOURNAL OF CLINICAL INTERNAL MEDICINE
2011年
2期
128-131
,共4页
李雪锋%彭红燕%王辉%黄成虎%孙明瑾%曾玉琴%胡清%周章
李雪鋒%彭紅燕%王輝%黃成虎%孫明瑾%曾玉琴%鬍清%週章
리설봉%팽홍연%왕휘%황성호%손명근%증옥금%호청%주장
FAK%RNA干扰%人胰腺癌%药物敏感性%凋亡%吉西他滨
FAK%RNA榦擾%人胰腺癌%藥物敏感性%凋亡%吉西他濱
FAK%RNA간우%인이선암%약물민감성%조망%길서타빈
目的 探讨RNA干扰技术抑制黏着斑激酶(FAK)基因表达增强人胰腺癌PANC-1细胞对化疗药物敏感性及凋亡能力的研究.方法 针对FAK mRNA序列设计合成短发夹状干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-FAK重组表达载体,转染人胰腺癌PANC-1细胞;通过RT-PCR分析其对PANC-1细胞内源性FAK表达的影响;激光共聚焦显微镜检测PANC-1细胞凋亡的形态学改变;用四甲基偶氮唑蓝法观察PANC-1细胞对化疗药物吉西他滨敏感性的改变;采用分光光度计检测 Caspase 活性.结果 成功构建 pRNAT-FAK重组质粒,并成功转染PANC-1细胞;RT-PCR证实重组质粒在mRNA显著抑制FAK基因表达(P＜0.01);吉西他滨组及吉西他滨加pRNAT-FAK组细胞则检测出明显的细胞凋亡;四甲基偶氮唑蓝结果证明在和吉西他滨联合作用下,pRNAT-FAK组PANC-1细胞的生长抑制率明显增高(P＜0.01);Caspase 3活性明显高于空白对照绀和阴性对照组.结论 pRNAT-FAK可抑制FAK在人胰腺癌PANC-1细胞中的表达,并增强PANC-1细胞对吉西他滨敏感性.
目的 探討RNA榦擾技術抑製黏著斑激酶(FAK)基因錶達增彊人胰腺癌PANC-1細胞對化療藥物敏感性及凋亡能力的研究.方法 針對FAK mRNA序列設計閤成短髮夾狀榦擾RNA(siRNA)的DNA模闆,構建pRNAT-FAK重組錶達載體,轉染人胰腺癌PANC-1細胞;通過RT-PCR分析其對PANC-1細胞內源性FAK錶達的影響;激光共聚焦顯微鏡檢測PANC-1細胞凋亡的形態學改變;用四甲基偶氮唑藍法觀察PANC-1細胞對化療藥物吉西他濱敏感性的改變;採用分光光度計檢測 Caspase 活性.結果 成功構建 pRNAT-FAK重組質粒,併成功轉染PANC-1細胞;RT-PCR證實重組質粒在mRNA顯著抑製FAK基因錶達(P＜0.01);吉西他濱組及吉西他濱加pRNAT-FAK組細胞則檢測齣明顯的細胞凋亡;四甲基偶氮唑藍結果證明在和吉西他濱聯閤作用下,pRNAT-FAK組PANC-1細胞的生長抑製率明顯增高(P＜0.01);Caspase 3活性明顯高于空白對照紺和陰性對照組.結論 pRNAT-FAK可抑製FAK在人胰腺癌PANC-1細胞中的錶達,併增彊PANC-1細胞對吉西他濱敏感性.
목적 탐토RNA간우기술억제점착반격매(FAK)기인표체증강인이선암PANC-1세포대화료약물민감성급조망능력적연구.방법 침대FAK mRNA서렬설계합성단발협상간우RNA(siRNA)적DNA모판,구건pRNAT-FAK중조표체재체,전염인이선암PANC-1세포;통과RT-PCR분석기대PANC-1세포내원성FAK표체적영향;격광공취초현미경검측PANC-1세포조망적형태학개변;용사갑기우담서람법관찰PANC-1세포대화료약물길서타빈민감성적개변;채용분광광도계검측 Caspase 활성.결과 성공구건 pRNAT-FAK중조질립,병성공전염PANC-1세포;RT-PCR증실중조질립재mRNA현저억제FAK기인표체(P＜0.01);길서타빈조급길서타빈가pRNAT-FAK조세포칙검측출명현적세포조망;사갑기우담서람결과증명재화길서타빈연합작용하,pRNAT-FAK조PANC-1세포적생장억제솔명현증고(P＜0.01);Caspase 3활성명현고우공백대조감화음성대조조.결론 pRNAT-FAK가억제FAK재인이선암PANC-1세포중적표체,병증강PANC-1세포대길서타빈민감성.
