江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
4期
30-32
,共3页
彭礼琼%金则新%祁彩虹%李钧敏%王强
彭禮瓊%金則新%祁綵虹%李鈞敏%王彊
팽례경%금칙신%기채홍%리균민%왕강
麻栎%ISSR%优化%遗传多样性
痳櫟%ISSR%優化%遺傳多樣性
마력%ISSR%우화%유전다양성
采用改进的SDS法提取麻栎基因组DNA,利用单因素试验对ISSR反应体系中的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、Taq DNA聚合酶用量、BSA浓度、引物用量进行筛选和优化,得出了适用于麻栎ISSR分析的扩增条件:10 μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(200 mmol/L Tris·HCl,pH值8.8,100 mmol/L KC1,1％ TritonX - 100,100 mmol/L( NH4 )2SO4,15 mmol/L MgCl2),0.75 U Taq DNA聚合酶,10 ng模板DNA,10 pmol引物,0.4mmol/LdNTP,3.5 mmol/L Mg2+.利用优化反应体系从100个ISSR引物中筛选出12个重复性好、稳定性高的引物对21个麻栎个体的DNA进行扩增,共得到85个位点,其中61个为多态位点,多态位点百分率为71.76％,Nei指数为0.322 2,Shannon信息指数为0.459 3,表明麻栎的遗传多样性处于较高水平.
採用改進的SDS法提取痳櫟基因組DNA,利用單因素試驗對ISSR反應體繫中的Mg2+濃度、dNTP濃度、模闆DNA用量、Taq DNA聚閤酶用量、BSA濃度、引物用量進行篩選和優化,得齣瞭適用于痳櫟ISSR分析的擴增條件:10 μL PCR反應體積,1×Taq酶配套緩遲液(200 mmol/L Tris·HCl,pH值8.8,100 mmol/L KC1,1％ TritonX - 100,100 mmol/L( NH4 )2SO4,15 mmol/L MgCl2),0.75 U Taq DNA聚閤酶,10 ng模闆DNA,10 pmol引物,0.4mmol/LdNTP,3.5 mmol/L Mg2+.利用優化反應體繫從100箇ISSR引物中篩選齣12箇重複性好、穩定性高的引物對21箇痳櫟箇體的DNA進行擴增,共得到85箇位點,其中61箇為多態位點,多態位點百分率為71.76％,Nei指數為0.322 2,Shannon信息指數為0.459 3,錶明痳櫟的遺傳多樣性處于較高水平.
채용개진적SDS법제취마력기인조DNA,이용단인소시험대ISSR반응체계중적Mg2+농도、dNTP농도、모판DNA용량、Taq DNA취합매용량、BSA농도、인물용량진행사선화우화,득출료괄용우마력ISSR분석적확증조건:10 μL PCR반응체적,1×Taq매배투완충액(200 mmol/L Tris·HCl,pH치8.8,100 mmol/L KC1,1％ TritonX - 100,100 mmol/L( NH4 )2SO4,15 mmol/L MgCl2),0.75 U Taq DNA취합매,10 ng모판DNA,10 pmol인물,0.4mmol/LdNTP,3.5 mmol/L Mg2+.이용우화반응체계종100개ISSR인물중사선출12개중복성호、은정성고적인물대21개마력개체적DNA진행확증,공득도85개위점,기중61개위다태위점,다태위점백분솔위71.76％,Nei지수위0.322 2,Shannon신식지수위0.459 3,표명마력적유전다양성처우교고수평.
