大肠杆菌酸性磷酸酶基因克隆表达及应用
대장간균산성린산매기인극륭표체급응용
Cloning, Expression and Application of Acid Phosphatase from Escherichia coli K-12
  • 万方数据
    生物技术通报 생물기술통보
    BIOTECHNOLOGY BULLETIN
    2012年 5期 110-115 ,共6页

    黄莹%丁庆豹%欧伶%魏晓琨%许彦梅%张春艳%王玥

    황형%정경표%구령%위효곤%허언매%장춘염%왕모

    大肠杆菌%酸性磷酸酶%IMP 大腸桿菌%痠性燐痠酶%IMP
    대장간균%산성린산매%IMP
    将大肠杆菌K-12的酸性磷酸酶(AphA)完整基因和去信号肽基因分别克隆到pET-28a(+)栽体上,并转化入大肠杆菌BL21( DE3)中.经诱导检测,重组菌均能表达出高活性的可溶性酶蛋白,去信号肽表达更稳定.对重组菌的活性研究表明,相对于野生菌,重组菌酶活力得到大幅度提高,同时,以pNPP、肌苷为底物进行磷酸转移催化反应,在pH4.0-6.0、反应温度37℃条件下,约有30％的肌苷可转化为IMP,但随着反应的进行所形成的IMP又被该酶降解,向反应液中加入EDTA即可明显抑制酶的水解活性,减缓IMP的降解速率.
    장대장간균K-12적산성린산매(AphA)완정기인화거신호태기인분별극륭도pET-28a(+)재체상,병전화입대장간균BL21( DE3)중.경유도검측,중조균균능표체출고활성적가용성매단백,거신호태표체경은정.대중조균적활성연구표명,상대우야생균,중조균매활력득도대폭도제고,동시,이pNPP、기감위저물진행린산전이최화반응,재pH4.0-6.0、반응온도37℃조건하,약유30％적기감가전화위IMP,단수착반응적진행소형성적IMP우피해매강해,향반응액중가입EDTA즉가명현억제매적수해활성,감완IMP적강해속솔.
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