CAJ | 학술논문

目的:分别构建信号转导与转录活化因子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)过表达及RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,研究STAT6基因表达对人结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响.方法:以人胚肾HEK293FT细胞cDNA为模板,PCR扩增STAT6基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF)片段,化学合成针对STAT6基因的RNAi靶向单链片段,通过pLVTHm慢病毒载体三质粒包装系统对以上2种片段进行慢病毒颗粒包装；再用病毒感染结肠癌RKO细胞,获得稳定表达STAT6-ORF和STAT6-RNAi的细胞株.RT-PCR和蛋白质印迹法检测稳定感染细胞株中STAT6基因的表达情况,CCK8法检测细胞活性的变化,Transwell实验检测细胞迁移能力的变化.结果:成功构建STAT6-ORF和STAT6-RNAi慢病毒表达载体,并获得稳定表达STAT6的相应RKO细胞株.与对照组细胞相比,STAT6-ORF转染组细胞的增殖速度加快不明显(P=0.609),细胞迁移能力显著增强(P＜0.01);而STAT6-RNAi转染组的细胞活性显著降低(P＜0.001),迁移能力显著下降(P＜0.01).结论:STAT6可能是促进结肠癌细胞增殖和迁移的重要转录因子.
목적:분별구건신호전도여전록활화인자6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)과표체급RNA간우(RNA interference,RNAi)만병독재체,연구STAT6기인표체대인결장암RKO세포증식화천이적영향.방법:이인배신HEK293FT세포cDNA위모판,PCR확증STAT6기인적완정개방열독광(open reading frame,ORF)편단,화학합성침대STAT6기인적RNAi파향단련편단,통과pLVTHm만병독재체삼질립포장계통대이상2충편단진행만병독과립포장；재용병독감염결장암RKO세포,획득은정표체STAT6-ORF화STAT6-RNAi적세포주.RT-PCR화단백질인적법검측은정감염세포주중STAT6기인적표체정황,CCK8법검측세포활성적변화,Transwell실험검측세포천이능력적변화.결과:성공구건STAT6-ORF화STAT6-RNAi만병독표체재체,병획득은정표체STAT6적상응RKO세포주.여대조조세포상비,STAT6-ORF전염조세포적증식속도가쾌불명현(P=0.609),세포천이능력현저증강(P＜0.01);이STAT6-RNAi전염조적세포활성현저강저(P＜0.001),천이능력현저하강(P＜0.01).결론:STAT6가능시촉진결장암세포증식화천이적중요전록인자.