眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
4期
319-323
,共5页
杜兆东%李颖%胡运韬%罗莉莎%马志中
杜兆東%李穎%鬍運韜%囉莉莎%馬誌中
두조동%리영%호운도%라리사%마지중
蛋白酪氨酸磷酸酶%视网膜色素上皮%原钒酸钠%α-平滑肌肌动蛋白
蛋白酪氨痠燐痠酶%視網膜色素上皮%原釩痠鈉%α-平滑肌肌動蛋白
단백락안산린산매%시망막색소상피%원범산납%α-평활기기동단백
目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)在大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中的表达及其抑制剂原钒酸钠(SOV)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 免疫荧光染色法观察PTP的3种典型亚型PTP1B、PTP-LAR及PTEN在大鼠RPE细胞中的表达;SOV与培养液共培养RPE细胞为实验组,正常RPE细胞为对照组.实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测PTP1B、PTP-LAR及PTEN基因表达的变化,免疫荧光染色法观察α-SMA在细胞中表达的改变.结果 PTP1B在非融合和融合大鼠RPE细胞的细胞质和细胞核中均有明显表达,PTP-LAR在非融合细胞中以细胞核膜表达为主,而在融合细胞中主要表达于细胞质,PTEN未见明显表达.SOV孵育后PTP1B、PTP-LAR mRNA的表达量均明显下降(P<0.01),PTEN mRNA表达量很少,实验组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光检测发现,随着SOV浓度的增加α-SMA阳性细胞比例明显增加(P<0.01),表达明显增强,其在细胞内的分布状态也有明显改变.结论 PTP1B、PTP-LAR在体外培养的大鼠RPE细胞中有明显表达,SOV可明显抑制其作用并调节α-SMA的表达和分布.
目的 探討蛋白酪氨痠燐痠酶(PTP)在大鼠視網膜色素上皮(RPE)細胞中的錶達及其抑製劑原釩痠鈉(SOV)對α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)錶達的影響.方法 免疫熒光染色法觀察PTP的3種典型亞型PTP1B、PTP-LAR及PTEN在大鼠RPE細胞中的錶達;SOV與培養液共培養RPE細胞為實驗組,正常RPE細胞為對照組.實時定量聚閤酶鏈反應(real-time PCR)檢測PTP1B、PTP-LAR及PTEN基因錶達的變化,免疫熒光染色法觀察α-SMA在細胞中錶達的改變.結果 PTP1B在非融閤和融閤大鼠RPE細胞的細胞質和細胞覈中均有明顯錶達,PTP-LAR在非融閤細胞中以細胞覈膜錶達為主,而在融閤細胞中主要錶達于細胞質,PTEN未見明顯錶達.SOV孵育後PTP1B、PTP-LAR mRNA的錶達量均明顯下降(P<0.01),PTEN mRNA錶達量很少,實驗組與對照組相比差異無統計學意義(P>0.05);免疫熒光檢測髮現,隨著SOV濃度的增加α-SMA暘性細胞比例明顯增加(P<0.01),錶達明顯增彊,其在細胞內的分佈狀態也有明顯改變.結論 PTP1B、PTP-LAR在體外培養的大鼠RPE細胞中有明顯錶達,SOV可明顯抑製其作用併調節α-SMA的錶達和分佈.
목적 탐토단백락안산린산매(PTP)재대서시망막색소상피(RPE)세포중적표체급기억제제원범산납(SOV)대α-평활기기동단백(α-SMA)표체적영향.방법 면역형광염색법관찰PTP적3충전형아형PTP1B、PTP-LAR급PTEN재대서RPE세포중적표체;SOV여배양액공배양RPE세포위실험조,정상RPE세포위대조조.실시정량취합매련반응(real-time PCR)검측PTP1B、PTP-LAR급PTEN기인표체적변화,면역형광염색법관찰α-SMA재세포중표체적개변.결과 PTP1B재비융합화융합대서RPE세포적세포질화세포핵중균유명현표체,PTP-LAR재비융합세포중이세포핵막표체위주,이재융합세포중주요표체우세포질,PTEN미견명현표체.SOV부육후PTP1B、PTP-LAR mRNA적표체량균명현하강(P<0.01),PTEN mRNA표체량흔소,실험조여대조조상비차이무통계학의의(P>0.05);면역형광검측발현,수착SOV농도적증가α-SMA양성세포비례명현증가(P<0.01),표체명현증강,기재세포내적분포상태야유명현개변.결론 PTP1B、PTP-LAR재체외배양적대서RPE세포중유명현표체,SOV가명현억제기작용병조절α-SMA적표체화분포.