中国中西医结合消化杂志
中國中西醫結閤消化雜誌
중국중서의결합소화잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON DIGESTION
2005年
3期
144-147
,共4页
江远%李泽松%江福生%聂广
江遠%李澤鬆%江福生%聶廣
강원%리택송%강복생%섭엄
基因芯片%莪术醇%肝纤维化%肝星状细胞
基因芯片%莪術醇%肝纖維化%肝星狀細胞
기인심편%아술순%간섬유화%간성상세포
[目的]研究莪术醇对肝星状细胞(HSC)-T6细胞基因表达的影响.[方法]从基因库中查询50种肝纤维化相关基因的mRNA序列,用寡核苷酸探针设计软件设计探针,在PE8909DNA合成仪上合成寡核苷酸,用OGR-04点样仪及醛基化玻片制备成基因芯片.以莪术醇不同浓度含药培养液培养HSC-T6细胞,根据细胞毒性实验,确定细胞存活率在50%以上的药物浓度作为实验所用浓度,每组设空白对照,分别按1、6、12、24 h 4个时间段收集细胞.按操作步骤提取细胞总RNA,经反转录荧光标记,杂交和洗涤,用Genepix 4000B扫描仪扫描芯片,ImaGene 4.2软件进行数据分析和归一化处理,使用看家基因和阳性对照对Cy3和Cy5扫描结果进行校正.[结果]莪术醇1.562 5 μg/ml作用HSC-T6细胞12 h,可使基因转化生长因子β1、细胞色素P450a表达下调2.3、2.1倍.[结论]从分子水平揭示了莪术有效成分莪术醇的抗肝纤维化机制.
[目的]研究莪術醇對肝星狀細胞(HSC)-T6細胞基因錶達的影響.[方法]從基因庫中查詢50種肝纖維化相關基因的mRNA序列,用寡覈苷痠探針設計軟件設計探針,在PE8909DNA閤成儀上閤成寡覈苷痠,用OGR-04點樣儀及醛基化玻片製備成基因芯片.以莪術醇不同濃度含藥培養液培養HSC-T6細胞,根據細胞毒性實驗,確定細胞存活率在50%以上的藥物濃度作為實驗所用濃度,每組設空白對照,分彆按1、6、12、24 h 4箇時間段收集細胞.按操作步驟提取細胞總RNA,經反轉錄熒光標記,雜交和洗滌,用Genepix 4000B掃描儀掃描芯片,ImaGene 4.2軟件進行數據分析和歸一化處理,使用看傢基因和暘性對照對Cy3和Cy5掃描結果進行校正.[結果]莪術醇1.562 5 μg/ml作用HSC-T6細胞12 h,可使基因轉化生長因子β1、細胞色素P450a錶達下調2.3、2.1倍.[結論]從分子水平揭示瞭莪術有效成分莪術醇的抗肝纖維化機製.
[목적]연구아술순대간성상세포(HSC)-T6세포기인표체적영향.[방법]종기인고중사순50충간섬유화상관기인적mRNA서렬,용과핵감산탐침설계연건설계탐침,재PE8909DNA합성의상합성과핵감산,용OGR-04점양의급철기화파편제비성기인심편.이아술순불동농도함약배양액배양HSC-T6세포,근거세포독성실험,학정세포존활솔재50%이상적약물농도작위실험소용농도,매조설공백대조,분별안1、6、12、24 h 4개시간단수집세포.안조작보취제취세포총RNA,경반전록형광표기,잡교화세조,용Genepix 4000B소묘의소묘심편,ImaGene 4.2연건진행수거분석화귀일화처리,사용간가기인화양성대조대Cy3화Cy5소묘결과진행교정.[결과]아술순1.562 5 μg/ml작용HSC-T6세포12 h,가사기인전화생장인자β1、세포색소P450a표체하조2.3、2.1배.[결론]종분자수평게시료아술유효성분아술순적항간섬유화궤제.