CAJ | 학술논문

采用注入嵌合法初步建立了一套黄牛和水牛种间嵌合的程序与方法.采用机械剥离法或免疫外科法分离胚胎内细胞团(ICM),然后注入到已去除ICM的受体囊胚中构建形成水牛和黄牛的嵌合胚.结果发现,在用免疫外科法分离ICM时,抗血清的灭活温度从57℃升至63.5℃,ICM的获得数显著升高(0% vs 100%,P＜0.01),如若在分离培养液中添加6%的胎牛血清(FCS),ICM的获得数大大降低(97.6% vs 0%,P＜0.01).采用免疫外科法分离得到的黄牛ICM进行水牛囊胚的ICM置换重组,重组胚的存活率与机械剥离法得到的ICM无显著差异(91.4% vs 87.5%,P＞0.05);但囊胚孵化率则显著提高(80% vs 43.8%;P＜0.05).以上结果表明,(1)水牛和黄牛胚胎通过ICM置换获得的种间嵌合胚胎能继续发育;(2)用于黄牛ICM分离的兔抗牛抗血清需在63.5 ℃灭活30 min,且分离需在无血清的培养液中进行;(3)通过分离ICM置换进行胚胎嵌合时,免疫外科法优于显微手术法.
채용주입감합법초보건립료일투황우화수우충간감합적정서여방법.채용궤계박리법혹면역외과법분리배태내세포단(ICM),연후주입도이거제ICM적수체낭배중구건형성수우화황우적감합배.결과발현,재용면역외과법분리ICM시,항혈청적멸활온도종57℃승지63.5℃,ICM적획득수현저승고(0% vs 100%,P＜0.01),여약재분리배양액중첨가6%적태우혈청(FCS),ICM적획득수대대강저(97.6% vs 0%,P＜0.01).채용면역외과법분리득도적황우ICM진행수우낭배적ICM치환중조,중조배적존활솔여궤계박리법득도적ICM무현저차이(91.4% vs 87.5%,P＞0.05);단낭배부화솔칙현저제고(80% vs 43.8%;P＜0.05).이상결과표명,(1)수우화황우배태통과ICM치환획득적충간감합배태능계속발육;(2)용우황우ICM분리적토항우항혈청수재63.5 ℃멸활30 min,차분리수재무혈청적배양액중진행;(3)통과분리ICM치환진행배태감합시,면역외과법우우현미수술법.