农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
677-683
,共7页
吴旺泽%彭晓莉%王晓明%王蒂
吳旺澤%彭曉莉%王曉明%王蒂
오왕택%팽효리%왕효명%왕체
马铃薯%水通道蛋白%基因克隆%序列分析%蛋白质结构预测%瞬时表达
馬鈴藷%水通道蛋白%基因剋隆%序列分析%蛋白質結構預測%瞬時錶達
마령서%수통도단백%기인극륭%서렬분석%단백질결구예측%순시표체
以干旱胁迫处理的马铃薯(Solanum tuberosum L.)普通栽培种Gannongshu No.2叶片为材料,提取总RNA,采用RT-PCR方法,扩增出编码288 aa序列的水通道蛋白基因StPIP1(Solanum tuberosum L. plasma membrane intrinsic protein gene)cDNA,GenBank登录号为DQ999080.用生物软件对StPIP1分析表明,StPIP1含有6个跨膜区,具有MIP家族的特征信号序列SGXHXNPAVT,还具有质膜水通道蛋白家族的特征信号序列GGGANXXXXGY和TGI/TNPARSL/FGAAI/VI/VF/YN.聚类分析表明和其它14个物种PIP1类水通道蛋白同源性在92%以上,属于质膜水通道蛋白PIP1类.三级结构预测表明和菠菜(Spinacia oleracea)(2B5F)水通道蛋白结构相似,单体由5个短环相连的6个亲水的跨膜螺旋,N-末端、C-末端以及B、D环位于细胞内,A环、C环及E环在细胞外.构建以rd29A启动子和CaMV35S启动子驱动的StPIP1和GFP(绿色荧光蛋白)融合基因表达载体,用基因枪转化洋葱(Allium cepa)表皮进行瞬时表达,结果表明StPIP1表达受干旱胁迫的调节.
以榦旱脅迫處理的馬鈴藷(Solanum tuberosum L.)普通栽培種Gannongshu No.2葉片為材料,提取總RNA,採用RT-PCR方法,擴增齣編碼288 aa序列的水通道蛋白基因StPIP1(Solanum tuberosum L. plasma membrane intrinsic protein gene)cDNA,GenBank登錄號為DQ999080.用生物軟件對StPIP1分析錶明,StPIP1含有6箇跨膜區,具有MIP傢族的特徵信號序列SGXHXNPAVT,還具有質膜水通道蛋白傢族的特徵信號序列GGGANXXXXGY和TGI/TNPARSL/FGAAI/VI/VF/YN.聚類分析錶明和其它14箇物種PIP1類水通道蛋白同源性在92%以上,屬于質膜水通道蛋白PIP1類.三級結構預測錶明和菠菜(Spinacia oleracea)(2B5F)水通道蛋白結構相似,單體由5箇短環相連的6箇親水的跨膜螺鏇,N-末耑、C-末耑以及B、D環位于細胞內,A環、C環及E環在細胞外.構建以rd29A啟動子和CaMV35S啟動子驅動的StPIP1和GFP(綠色熒光蛋白)融閤基因錶達載體,用基因鎗轉化洋蔥(Allium cepa)錶皮進行瞬時錶達,結果錶明StPIP1錶達受榦旱脅迫的調節.
이간한협박처리적마령서(Solanum tuberosum L.)보통재배충Gannongshu No.2협편위재료,제취총RNA,채용RT-PCR방법,확증출편마288 aa서렬적수통도단백기인StPIP1(Solanum tuberosum L. plasma membrane intrinsic protein gene)cDNA,GenBank등록호위DQ999080.용생물연건대StPIP1분석표명,StPIP1함유6개과막구,구유MIP가족적특정신호서렬SGXHXNPAVT,환구유질막수통도단백가족적특정신호서렬GGGANXXXXGY화TGI/TNPARSL/FGAAI/VI/VF/YN.취류분석표명화기타14개물충PIP1류수통도단백동원성재92%이상,속우질막수통도단백PIP1류.삼급결구예측표명화파채(Spinacia oleracea)(2B5F)수통도단백결구상사,단체유5개단배상련적6개친수적과막라선,N-말단、C-말단이급B、D배위우세포내,A배、C배급E배재세포외.구건이rd29A계동자화CaMV35S계동자구동적StPIP1화GFP(록색형광단백)융합기인표체재체,용기인창전화양총(Allium cepa)표피진행순시표체,결과표명StPIP1표체수간한협박적조절.