医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
3期
219-224
,共6页
林建炜%刘平%李祥柱%赵文君%郭风劲
林建煒%劉平%李祥柱%趙文君%郭風勁
림건위%류평%리상주%조문군%곽풍경
人类X盒结合蛋白%siRNA%真核表达载体
人類X盒結閤蛋白%siRNA%真覈錶達載體
인류X합결합단백%siRNA%진핵표체재체
目的 构建靶向人XBP1S的siRNA真核表达载体(pSUPER-XBP1S)并观察其对人HeLa细胞和HepG2细胞增殖能力的影响.方法 设计并合成针对XBP1S基因的siRNA,退火成互补双链后克隆至真核表达载体pSUPER构建重组质粒,并将其转染入HeLa细胞和HepG2细胞中.采用RT-PCR检测转染前后XBP1S在HeLa细胞和HepG2细胞中的转录,Western印迹检测转染前后XBP1S蛋白的表达;MTT法、细胞计数检测重组质粒对HeLa细胞和HepG2细胞增殖能力的影响.结果 重组质粒能有效地抑制HeLa细胞和HepG2细胞中XBP1S基因的转录和表达;转染HeLa细胞和HepG2细胞后,细胞增殖抑制率及细胞增殖数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建了靶向人XBP1S的siRNA表达载体pSUPER-XBP1S,并且有效的抑制了HeLa细胞和HepG2细胞中XBP1S的转录和表达,有效抑制了细胞的增殖能力.
目的 構建靶嚮人XBP1S的siRNA真覈錶達載體(pSUPER-XBP1S)併觀察其對人HeLa細胞和HepG2細胞增殖能力的影響.方法 設計併閤成針對XBP1S基因的siRNA,退火成互補雙鏈後剋隆至真覈錶達載體pSUPER構建重組質粒,併將其轉染入HeLa細胞和HepG2細胞中.採用RT-PCR檢測轉染前後XBP1S在HeLa細胞和HepG2細胞中的轉錄,Western印跡檢測轉染前後XBP1S蛋白的錶達;MTT法、細胞計數檢測重組質粒對HeLa細胞和HepG2細胞增殖能力的影響.結果 重組質粒能有效地抑製HeLa細胞和HepG2細胞中XBP1S基因的轉錄和錶達;轉染HeLa細胞和HepG2細胞後,細胞增殖抑製率及細胞增殖數與對照組比較,差異有統計學意義(P<0.05).結論 成功構建瞭靶嚮人XBP1S的siRNA錶達載體pSUPER-XBP1S,併且有效的抑製瞭HeLa細胞和HepG2細胞中XBP1S的轉錄和錶達,有效抑製瞭細胞的增殖能力.
목적 구건파향인XBP1S적siRNA진핵표체재체(pSUPER-XBP1S)병관찰기대인HeLa세포화HepG2세포증식능력적영향.방법 설계병합성침대XBP1S기인적siRNA,퇴화성호보쌍련후극륭지진핵표체재체pSUPER구건중조질립,병장기전염입HeLa세포화HepG2세포중.채용RT-PCR검측전염전후XBP1S재HeLa세포화HepG2세포중적전록,Western인적검측전염전후XBP1S단백적표체;MTT법、세포계수검측중조질립대HeLa세포화HepG2세포증식능력적영향.결과 중조질립능유효지억제HeLa세포화HepG2세포중XBP1S기인적전록화표체;전염HeLa세포화HepG2세포후,세포증식억제솔급세포증식수여대조조비교,차이유통계학의의(P<0.05).결론 성공구건료파향인XBP1S적siRNA표체재체pSUPER-XBP1S,병차유효적억제료HeLa세포화HepG2세포중XBP1S적전록화표체,유효억제료세포적증식능력.
