中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2010年
7期
977-979
,共3页
张冬梅%杨媚婷%刘瑛%于春雷%乌垠%李玉新%鲍永利
張鼕梅%楊媚婷%劉瑛%于春雷%烏垠%李玉新%鮑永利
장동매%양미정%류영%우춘뢰%오은%리옥신%포영리
IKKβ%载体构建%真核表达
IKKβ%載體構建%真覈錶達
IKKβ%재체구건%진핵표체
目的 构建核转录因子κB 抑制蛋白激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用.方法 从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβ cDNA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ.将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达.结果 酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示,瞬时转染重组质粒的人胚肾细胞HEK293中可有效表达IKKβ.结论 本研究成功构建了IKKβ真核表达载体,并能够在真核细胞中进行表达,为进一步研究IKKβ的生物学功能奠定了基础.
目的 構建覈轉錄因子κB 抑製蛋白激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β真覈錶達載體,以便進一步探討其生物學作用.方法 從人正常肝細胞L02中提取RNA,併利用IKKβ特異性引物通過RT-PCR方法擴增瞭IKKβ cDNA,併剋隆入pcDNA3載體中,構建重組載體pcDNA3-IKKβ.將重組載體轉染入HEK293細胞中,併通過免疫印跡方法檢測IKKβ的錶達.結果 酶切及測序結果顯示,重組質粒構建成功;免疫印跡結果顯示,瞬時轉染重組質粒的人胚腎細胞HEK293中可有效錶達IKKβ.結論 本研究成功構建瞭IKKβ真覈錶達載體,併能夠在真覈細胞中進行錶達,為進一步研究IKKβ的生物學功能奠定瞭基礎.
목적 구건핵전록인자κB 억제단백격매(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β진핵표체재체,이편진일보탐토기생물학작용.방법 종인정상간세포L02중제취RNA,병이용IKKβ특이성인물통과RT-PCR방법확증료IKKβ cDNA,병극륭입pcDNA3재체중,구건중조재체pcDNA3-IKKβ.장중조재체전염입HEK293세포중,병통과면역인적방법검측IKKβ적표체.결과 매절급측서결과현시,중조질립구건성공;면역인적결과현시,순시전염중조질립적인배신세포HEK293중가유효표체IKKβ.결론 본연구성공구건료IKKβ진핵표체재체,병능구재진핵세포중진행표체,위진일보연구IKKβ적생물학공능전정료기출.
