实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
18期
3279-3282
,共4页
彭克军%王秋林%张庆莲%段佳慧%郑崛村
彭剋軍%王鞦林%張慶蓮%段佳慧%鄭崛村
팽극군%왕추림%장경련%단가혜%정굴촌
Foxp3%真核裁体%转染%CD4+CD25-T细胞
Foxp3%真覈裁體%轉染%CD4+CD25-T細胞
Foxp3%진핵재체%전염%CD4+CD25-T세포
目的:构建人Foxp3基因的真核表达栽体并转染人CD4+CD2-T细胞,观察其在CD4-CD25-T细胞中的表达及功能.方法:构建人Foxp3基因pEGFP-N1真核表达栽体,经酶切及双向测序鉴定基因序列的正确性.通过电穿孔法将重组栽体转入人CD4+CD25-T细胞中,利用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率,采用3H-TdR掺入法检测转染细胞对单个核细胞增殖能力的影响.结果:酶切及测序鉴定pEGFP-Nl-Foxp3重组质粒基因序列完全正确,转染的CD4+CD25-T细胞Foxp3阳性表达率为23.7%,并显著抑制了单个核细胞的增殖能力.结论:成功构建了pEGFP-N1-Foxp3真核表达栽体,并使转染的CD4+CD25-T细胞具有调节性T细胞的功能.
目的:構建人Foxp3基因的真覈錶達栽體併轉染人CD4+CD2-T細胞,觀察其在CD4-CD25-T細胞中的錶達及功能.方法:構建人Foxp3基因pEGFP-N1真覈錶達栽體,經酶切及雙嚮測序鑒定基因序列的正確性.通過電穿孔法將重組栽體轉入人CD4+CD25-T細胞中,利用熒光顯微鏡及流式細胞術檢測轉染效率,採用3H-TdR摻入法檢測轉染細胞對單箇覈細胞增殖能力的影響.結果:酶切及測序鑒定pEGFP-Nl-Foxp3重組質粒基因序列完全正確,轉染的CD4+CD25-T細胞Foxp3暘性錶達率為23.7%,併顯著抑製瞭單箇覈細胞的增殖能力.結論:成功構建瞭pEGFP-N1-Foxp3真覈錶達栽體,併使轉染的CD4+CD25-T細胞具有調節性T細胞的功能.
목적:구건인Foxp3기인적진핵표체재체병전염인CD4+CD2-T세포,관찰기재CD4-CD25-T세포중적표체급공능.방법:구건인Foxp3기인pEGFP-N1진핵표체재체,경매절급쌍향측서감정기인서렬적정학성.통과전천공법장중조재체전입인CD4+CD25-T세포중,이용형광현미경급류식세포술검측전염효솔,채용3H-TdR참입법검측전염세포대단개핵세포증식능력적영향.결과:매절급측서감정pEGFP-Nl-Foxp3중조질립기인서렬완전정학,전염적CD4+CD25-T세포Foxp3양성표체솔위23.7%,병현저억제료단개핵세포적증식능력.결론:성공구건료pEGFP-N1-Foxp3진핵표체재체,병사전염적CD4+CD25-T세포구유조절성T세포적공능.