西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
6期
1093-1098
,共6页
李慧%丛郁%常有宏%蔺经%盛宝龙
李慧%叢鬱%常有宏%藺經%盛寶龍
리혜%총욱%상유굉%린경%성보룡
杜梨%胆碱单加氧酶%基因克隆%表达特点
杜梨%膽堿單加氧酶%基因剋隆%錶達特點
두리%담감단가양매%기인극륭%표체특점
为了解梨砧木—杜梨对非生物胁迫的防御机制,采用RT-PCR、RACE和长片段PCR技术从杜梨幼苗中获得1个甜菜碱合成相关的胆碱单加氧酶基因(PbCMO),运用生物信息学方法分析序列特点,并通过跨内含子引物进行半定量RT-PCR研究其在非生物胁迫下的表达情况.结果表明:(1) PbCMO基因cDNA序列编码区长1227bp,编码由408个氨基酸组成的多肽.其对应基因组DNA序列长2928 bp,由10个外显子和9个内含子组成.其推导的多肽预测的等电点为6.19,相对分子质量为46.27 kD,具备Rieske型铁硫[2Fe-2S]簇结合区域和非血红素单核态铁配位点序列,与枸杞CMO蛋白相似性最高(71%).(2)PbCMO在幼苗根和叶中均为诱导型表达,100mmol/L氯化钠、10% (W/V)聚乙二醇、180 mmol/L甘露醇或20 μmol/L脱落酸处理后其表达量明显上调,表明PbCMO对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA均存在表达响应,可能参与杜梨应对非生物胁迫的转录调节.
為瞭解梨砧木—杜梨對非生物脅迫的防禦機製,採用RT-PCR、RACE和長片段PCR技術從杜梨幼苗中穫得1箇甜菜堿閤成相關的膽堿單加氧酶基因(PbCMO),運用生物信息學方法分析序列特點,併通過跨內含子引物進行半定量RT-PCR研究其在非生物脅迫下的錶達情況.結果錶明:(1) PbCMO基因cDNA序列編碼區長1227bp,編碼由408箇氨基痠組成的多肽.其對應基因組DNA序列長2928 bp,由10箇外顯子和9箇內含子組成.其推導的多肽預測的等電點為6.19,相對分子質量為46.27 kD,具備Rieske型鐵硫[2Fe-2S]簇結閤區域和非血紅素單覈態鐵配位點序列,與枸杞CMO蛋白相似性最高(71%).(2)PbCMO在幼苗根和葉中均為誘導型錶達,100mmol/L氯化鈉、10% (W/V)聚乙二醇、180 mmol/L甘露醇或20 μmol/L脫落痠處理後其錶達量明顯上調,錶明PbCMO對鹽堿、榦旱、滲透脅迫和ABA均存在錶達響應,可能參與杜梨應對非生物脅迫的轉錄調節.
위료해리침목—두리대비생물협박적방어궤제,채용RT-PCR、RACE화장편단PCR기술종두리유묘중획득1개첨채감합성상관적담감단가양매기인(PbCMO),운용생물신식학방법분석서렬특점,병통과과내함자인물진행반정량RT-PCR연구기재비생물협박하적표체정황.결과표명:(1) PbCMO기인cDNA서렬편마구장1227bp,편마유408개안기산조성적다태.기대응기인조DNA서렬장2928 bp,유10개외현자화9개내함자조성.기추도적다태예측적등전점위6.19,상대분자질량위46.27 kD,구비Rieske형철류[2Fe-2S]족결합구역화비혈홍소단핵태철배위점서렬,여구기CMO단백상사성최고(71%).(2)PbCMO재유묘근화협중균위유도형표체,100mmol/L록화납、10% (W/V)취을이순、180 mmol/L감로순혹20 μmol/L탈락산처리후기표체량명현상조,표명PbCMO대염감、간한、삼투협박화ABA균존재표체향응,가능삼여두리응대비생물협박적전록조절.