中国卫生检验杂志
中國衛生檢驗雜誌
중국위생검험잡지
CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY
2005年
11期
1301-1302,1330
,共3页
陈宋义%李海波%赵哲%熊海平%崔晓燕
陳宋義%李海波%趙哲%熊海平%崔曉燕
진송의%리해파%조철%웅해평%최효연
大肠杆菌O157:H7%Vero毒素%基因表达
大腸桿菌O157:H7%Vero毒素%基因錶達
대장간균O157:H7%Vero독소%기인표체
目的:构建表达Vero毒素-1B亚基的重组质粒.方法:用PCR法扩增并用低熔点琼脂糖法回收Vero毒素-1B亚基基因,将其与质粒pGEX-4T-2重组,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒.将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析.结果:获得了克隆有Vero毒素-1B亚基基因的重组质粒,经诱导后表达分子量为 34 kDa 的新蛋白.结论:重组质粒pVT1B的构建和表达成功说明克隆的Vero毒素-1B亚基基因具有完整的阅读框架,使简便获得Vero毒素-1B亚基成为可能,为以后研究新型的肠出血性大肠杆菌疫苗及治疗用药奠定了基础.
目的:構建錶達Vero毒素-1B亞基的重組質粒.方法:用PCR法擴增併用低鎔點瓊脂糖法迴收Vero毒素-1B亞基基因,將其與質粒pGEX-4T-2重組,通過酶切圖譜和序列分析法篩選齣重組質粒.將含重組質粒的宿主菌誘導錶達後,提取全菌總蛋白進行SDS-PAGE電泳分析.結果:穫得瞭剋隆有Vero毒素-1B亞基基因的重組質粒,經誘導後錶達分子量為 34 kDa 的新蛋白.結論:重組質粒pVT1B的構建和錶達成功說明剋隆的Vero毒素-1B亞基基因具有完整的閱讀框架,使簡便穫得Vero毒素-1B亞基成為可能,為以後研究新型的腸齣血性大腸桿菌疫苗及治療用藥奠定瞭基礎.
목적:구건표체Vero독소-1B아기적중조질립.방법:용PCR법확증병용저용점경지당법회수Vero독소-1B아기기인,장기여질립pGEX-4T-2중조,통과매절도보화서렬분석법사선출중조질립.장함중조질립적숙주균유도표체후,제취전균총단백진행SDS-PAGE전영분석.결과:획득료극륭유Vero독소-1B아기기인적중조질립,경유도후표체분자량위 34 kDa 적신단백.결론:중조질립pVT1B적구건화표체성공설명극륭적Vero독소-1B아기기인구유완정적열독광가,사간편획득Vero독소-1B아기성위가능,위이후연구신형적장출혈성대장간균역묘급치료용약전정료기출.
