生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
512-515
,共4页
仇玮祎%王友亮%时令%孙岩松%滕艳%杨晓
仇瑋祎%王友亮%時令%孫巖鬆%滕豔%楊曉
구위의%왕우량%시령%손암송%등염%양효
壁细胞%潘氏细胞%杯状细胞%Cre重组酶%转基因小鼠%LacZ染色
壁細胞%潘氏細胞%杯狀細胞%Cre重組酶%轉基因小鼠%LacZ染色
벽세포%반씨세포%배상세포%Cre중조매%전기인소서%LacZ염색
目的:检测白蛋白启动子介导的Cre重组酶转基因小鼠Alb-Cre-2中Cre重组酶的组织分布及其在体内介导基因重组的作用.方法:将Alb-Cre小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠交配,利用PCR对Cre重组酶介导重组的组织特异性进行检测;然后,将Alb-Cre-2转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测.结果:PCR结果显示心、肺、胰、脑及消化道中Cre重组酶介导的Smad4基因发生重组;LacZ染色进一步表明Cre重组酶在肝细胞、胃壁细胞、空肠潘氏细胞、回肠杯状细胞、大肠杯状细胞、大肠柱状细胞及空泡细胞中特异性表达,并介导ROSA位点LoxP序列间的重组.结论:Alb-Cre-2转基因小鼠在消化道中具有一定的组织特异性,只在胃壁细胞、空肠潘氏细胞、回肠杯状细胞、大肠杯状细胞,大肠柱状细胞及空泡细胞等细胞类型中特异性表达,并能在体内成功地介导这些消化道上皮细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种研制在消化道特定细胞中特异性基因剔除小鼠的良好工具小鼠.
目的:檢測白蛋白啟動子介導的Cre重組酶轉基因小鼠Alb-Cre-2中Cre重組酶的組織分佈及其在體內介導基因重組的作用.方法:將Alb-Cre小鼠與Smad4條件基因打靶小鼠交配,利用PCR對Cre重組酶介導重組的組織特異性進行檢測;然後,將Alb-Cre-2轉基因小鼠與ROSA26報告小鼠交配,利用LacZ染色對雙轉基因暘性子代小鼠進行檢測.結果:PCR結果顯示心、肺、胰、腦及消化道中Cre重組酶介導的Smad4基因髮生重組;LacZ染色進一步錶明Cre重組酶在肝細胞、胃壁細胞、空腸潘氏細胞、迴腸杯狀細胞、大腸杯狀細胞、大腸柱狀細胞及空泡細胞中特異性錶達,併介導ROSA位點LoxP序列間的重組.結論:Alb-Cre-2轉基因小鼠在消化道中具有一定的組織特異性,隻在胃壁細胞、空腸潘氏細胞、迴腸杯狀細胞、大腸杯狀細胞,大腸柱狀細胞及空泡細胞等細胞類型中特異性錶達,併能在體內成功地介導這些消化道上皮細胞基因組上LoxP位點間的重組,是一種研製在消化道特定細胞中特異性基因剔除小鼠的良好工具小鼠.
목적:검측백단백계동자개도적Cre중조매전기인소서Alb-Cre-2중Cre중조매적조직분포급기재체내개도기인중조적작용.방법:장Alb-Cre소서여Smad4조건기인타파소서교배,이용PCR대Cre중조매개도중조적조직특이성진행검측;연후,장Alb-Cre-2전기인소서여ROSA26보고소서교배,이용LacZ염색대쌍전기인양성자대소서진행검측.결과:PCR결과현시심、폐、이、뇌급소화도중Cre중조매개도적Smad4기인발생중조;LacZ염색진일보표명Cre중조매재간세포、위벽세포、공장반씨세포、회장배상세포、대장배상세포、대장주상세포급공포세포중특이성표체,병개도ROSA위점LoxP서렬간적중조.결론:Alb-Cre-2전기인소서재소화도중구유일정적조직특이성,지재위벽세포、공장반씨세포、회장배상세포、대장배상세포,대장주상세포급공포세포등세포류형중특이성표체,병능재체내성공지개도저사소화도상피세포기인조상LoxP위점간적중조,시일충연제재소화도특정세포중특이성기인척제소서적량호공구소서.
