现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2006年
4期
13-15
,共3页
实时荧光定量%反转录聚合酶链反应%TNF-α基因
實時熒光定量%反轉錄聚閤酶鏈反應%TNF-α基因
실시형광정량%반전록취합매련반응%TNF-α기인
目的 建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达.方法 用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-α mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较.结果 实时荧光定量RT-PCR检测肿瘤患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常人,且半定量RT-PCR结果显示TNF-α出现类似的变化趋势.结论 所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测TNF-α mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确.
目的 建立實時熒光定量反轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測TNF-α基因mRNA錶達.方法 用T-A剋隆技術構建含TNF基因的載體作為標準模闆,採用熒光Taqman方法及探針標記技術,建立實時熒光定量RT-PCR方法,製備標準麯線,檢測腫瘤患者與正常人外週血單箇覈細胞的TNF-α mRNA錶達水平變化,併與半定量RT-PCR檢測結果進行比較.結果 實時熒光定量RT-PCR檢測腫瘤患者外週血單箇覈細胞TNF-αmRNA錶達明顯高于正常人,且半定量RT-PCR結果顯示TNF-α齣現類似的變化趨勢.結論 所建立的實時熒光定量RT-PCR用于檢測TNF-α mRNA錶達,結果用拷貝數錶示,比半定量RT-PCR更靈敏、準確.
목적 건립실시형광정량반전록취합매련반응(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)법검측TNF-α기인mRNA표체.방법 용T-A극륭기술구건함TNF기인적재체작위표준모판,채용형광Taqman방법급탐침표기기술,건립실시형광정량RT-PCR방법,제비표준곡선,검측종류환자여정상인외주혈단개핵세포적TNF-α mRNA표체수평변화,병여반정량RT-PCR검측결과진행비교.결과 실시형광정량RT-PCR검측종류환자외주혈단개핵세포TNF-αmRNA표체명현고우정상인,차반정량RT-PCR결과현시TNF-α출현유사적변화추세.결론 소건립적실시형광정량RT-PCR용우검측TNF-α mRNA표체,결과용고패수표시,비반정량RT-PCR경령민、준학.
