微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
4期
531-536
,共6页
葛宜和%黄显清%张雪洪%许煜泉
葛宜和%黃顯清%張雪洪%許煜泉
갈의화%황현청%장설홍%허욱천
假单胞菌M18%GacA%RsmA%双突变%调控机制
假單胞菌M18%GacA%RsmA%雙突變%調控機製
가단포균M18%GacA%RsmA%쌍돌변%조공궤제
假单胞菌M18是一株可同时合成并分泌吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和藤黄绿脓菌素(Pyoluteorin,Plt)两种抗生物质的生防菌株.为了进一步研究假单胞菌M18抗生物质合成代谢的调控方式与机制,在分别构建gacA、rsmA等单基因突变株基础上,又构建了gacArsmA双基因突变株M18GR以及gacA'-'lacZ和rsmA'-'lacZ等翻译融合表达载体(pMEGA和pMERA).通过在PPM和KMB两种培养基中发酵培养和两种抗生物质PCA和Plt的HPLC定量测定显示,双突变株M18GR的PCA和Plt的合成量不论在PPM还是在KMB培养基中都介于单突变株M18G和M18R之间.由实验结果分析推测,两种调控因子对抗生物质合成的调控作用不是发生在转录水平,很可能发生在转录后水平.由β-半乳糖苷酶的定量分析表明,在假单胞菌M18中,两种调控因子不存在自诱导机制;虽然GacA未调控RsmA的合成,但RsmA可能部分正向调控GacA的表达.
假單胞菌M18是一株可同時閤成併分泌吩嗪-1-羧痠(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和籐黃綠膿菌素(Pyoluteorin,Plt)兩種抗生物質的生防菌株.為瞭進一步研究假單胞菌M18抗生物質閤成代謝的調控方式與機製,在分彆構建gacA、rsmA等單基因突變株基礎上,又構建瞭gacArsmA雙基因突變株M18GR以及gacA'-'lacZ和rsmA'-'lacZ等翻譯融閤錶達載體(pMEGA和pMERA).通過在PPM和KMB兩種培養基中髮酵培養和兩種抗生物質PCA和Plt的HPLC定量測定顯示,雙突變株M18GR的PCA和Plt的閤成量不論在PPM還是在KMB培養基中都介于單突變株M18G和M18R之間.由實驗結果分析推測,兩種調控因子對抗生物質閤成的調控作用不是髮生在轉錄水平,很可能髮生在轉錄後水平.由β-半乳糖苷酶的定量分析錶明,在假單胞菌M18中,兩種調控因子不存在自誘導機製;雖然GacA未調控RsmA的閤成,但RsmA可能部分正嚮調控GacA的錶達.
가단포균M18시일주가동시합성병분비분진-1-최산(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)화등황록농균소(Pyoluteorin,Plt)량충항생물질적생방균주.위료진일보연구가단포균M18항생물질합성대사적조공방식여궤제,재분별구건gacA、rsmA등단기인돌변주기출상,우구건료gacArsmA쌍기인돌변주M18GR이급gacA'-'lacZ화rsmA'-'lacZ등번역융합표체재체(pMEGA화pMERA).통과재PPM화KMB량충배양기중발효배양화량충항생물질PCA화Plt적HPLC정량측정현시,쌍돌변주M18GR적PCA화Plt적합성량불론재PPM환시재KMB배양기중도개우단돌변주M18G화M18R지간.유실험결과분석추측,량충조공인자대항생물질합성적조공작용불시발생재전록수평,흔가능발생재전록후수평.유β-반유당감매적정량분석표명,재가단포균M18중,량충조공인자불존재자유도궤제;수연GacA미조공RsmA적합성,단RsmA가능부분정향조공GacA적표체.
