CAJ | 학술논문

背景:他汀类药物可促进急性缺血后的血管新生、加速球囊损伤血管的再内皮化并减少新内膜下组织的增生,且这两个作用均与血管内皮祖细胞密切相关.目的:通过体外培养人脐静脉血血管内皮祖细胞,观察辛伐他汀对血管内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响.设计、时间及地点:以细胞为观察对象,分组对比实验,于2006-02/10在吉林大学基础医学院病理生理教研室完成.材料:人脐静脉血采集来源于吉林大学第二临床医学院妇产科6名正常足月顺产健康产妇.方法:密度梯度离心法分离培养人脐静脉血血管内皮祖细胞.通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白和荆豆凝血素Ⅰ情况,流式细胞仪定量检测血管内皮祖细胞表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定血管内皮祖细胞.倒置显微镜下观察血管内皮祖细胞形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线.实验按M199培养基含辛伐他汀纯品浓度不同分5组,分别为0, 0.01,0.1,1,10 μmol/L 辛伐他汀组,其中0 μmol/L作对照.四甲基偶氮唑盐比色法观察血管内皮祖细胞增殖情况,计数贴壁细胞数法评价血管内皮祖细胞的黏附程度.主要观察指标:原代培养血管内皮祖细胞形态变化;各组细胞增殖及黏附能力.结果:①培养细胞呈长梭形,接种2～4 d 梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6～10 d 贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10～14 d 细胞融合呈集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期.②激光共聚焦显微镜鉴定乙酰化低密度脂蛋白、荆豆凝血素Ⅰ双染阳性的细胞为正在分化的血管内皮祖细胞.③流式细胞仪检测细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为(7.30±2.71)%、(42.00±6.42)%,(89.30±10.45)%.④四甲基偶氮唑盐比色结果表明各浓度组血管内皮祖细胞增殖活力、贴壁的血管内皮祖细胞数均较对照组增强(P < 0.05);但以1 μmol/L 浓度下血管内皮祖细胞增殖活力最强.结论:辛伐他汀能增强体外培养血管内皮祖细胞的扩增及黏附能力. 揹景:他汀類藥物可促進急性缺血後的血管新生、加速毬囊損傷血管的再內皮化併減少新內膜下組織的增生,且這兩箇作用均與血管內皮祖細胞密切相關.目的:通過體外培養人臍靜脈血血管內皮祖細胞,觀察辛伐他汀對血管內皮祖細胞擴增及黏附能力的影響.設計、時間及地點:以細胞為觀察對象,分組對比實驗,于2006-02/10在吉林大學基礎醫學院病理生理教研室完成.材料:人臍靜脈血採集來源于吉林大學第二臨床醫學院婦產科6名正常足月順產健康產婦.方法:密度梯度離心法分離培養人臍靜脈血血管內皮祖細胞.通過免疫熒光法觀察內皮細胞吸收乙酰化低密度脂蛋白和荊豆凝血素Ⅰ情況,流式細胞儀定量檢測血管內皮祖細胞錶麵CD133、CD34和KDR抗原錶達暘性率來鑒定血管內皮祖細胞.倒置顯微鏡下觀察血管內皮祖細胞形態學變化,計數細胞併繪製生長麯線.實驗按M199培養基含辛伐他汀純品濃度不同分5組,分彆為0, 0.01,0.1,1,10 μmol/L 辛伐他汀組,其中0 μmol/L作對照.四甲基偶氮唑鹽比色法觀察血管內皮祖細胞增殖情況,計數貼壁細胞數法評價血管內皮祖細胞的黏附程度.主要觀察指標:原代培養血管內皮祖細胞形態變化;各組細胞增殖及黏附能力.結果:①培養細胞呈長梭形,接種2～4 d 梭形形態細胞較少,為細胞生長的潛伏期;6～10 d 貼壁梭形細胞逐漸增多,為對數增殖期;10～14 d 細胞融閤呈集落樣生長,梭形細胞明顯增多,進入生長平檯期.②激光共聚焦顯微鏡鑒定乙酰化低密度脂蛋白、荊豆凝血素Ⅰ雙染暘性的細胞為正在分化的血管內皮祖細胞.③流式細胞儀檢測細胞錶達CD133、CD34和KDR抗原的暘性率分彆為(7.30±2.71)%、(42.00±6.42)%,(89.30±10.45)%.④四甲基偶氮唑鹽比色結果錶明各濃度組血管內皮祖細胞增殖活力、貼壁的血管內皮祖細胞數均較對照組增彊(P < 0.05);但以1 μmol/L 濃度下血管內皮祖細胞增殖活力最彊.結論:辛伐他汀能增彊體外培養血管內皮祖細胞的擴增及黏附能力.
배경:타정류약물가촉진급성결혈후적혈관신생、가속구낭손상혈관적재내피화병감소신내막하조직적증생,차저량개작용균여혈관내피조세포밀절상관.목적:통과체외배양인제정맥혈혈관내피조세포,관찰신벌타정대혈관내피조세포확증급점부능력적영향.설계、시간급지점:이세포위관찰대상,분조대비실험,우2006-02/10재길림대학기출의학원병리생리교연실완성.재료:인제정맥혈채집래원우길림대학제이림상의학원부산과6명정상족월순산건강산부.방법:밀도제도리심법분리배양인제정맥혈혈관내피조세포.통과면역형광법관찰내피세포흡수을선화저밀도지단백화형두응혈소Ⅰ정황,류식세포의정량검측혈관내피조세포표면CD133、CD34화KDR항원표체양성솔래감정혈관내피조세포.도치현미경하관찰혈관내피조세포형태학변화,계수세포병회제생장곡선.실험안M199배양기함신벌타정순품농도불동분5조,분별위0, 0.01,0.1,1,10 μmol/L 신벌타정조,기중0 μmol/L작대조.사갑기우담서염비색법관찰혈관내피조세포증식정황,계수첩벽세포수법평개혈관내피조세포적점부정도.주요관찰지표:원대배양혈관내피조세포형태변화;각조세포증식급점부능력.결과:①배양세포정장사형,접충2～4 d 사형형태세포교소,위세포생장적잠복기;6～10 d 첩벽사형세포축점증다,위대수증식기;10～14 d 세포융합정집락양생장,사형세포명현증다,진입생장평태기.②격광공취초현미경감정을선화저밀도지단백、형두응혈소Ⅰ쌍염양성적세포위정재분화적혈관내피조세포.③류식세포의검측세포표체CD133、CD34화KDR항원적양성솔분별위(7.30±2.71)%、(42.00±6.42)%,(89.30±10.45)%.④사갑기우담서염비색결과표명각농도조혈관내피조세포증식활력、첩벽적혈관내피조세포수균교대조조증강(P < 0.05);단이1 μmol/L 농도하혈관내피조세포증식활력최강.결론:신벌타정능증강체외배양혈관내피조세포적확증급점부능력.