上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2009年
2期
126-129,144
,共5页
茶黄素类%黏蛋白5AC%人中性粒细胞弹性蛋白酶
茶黃素類%黏蛋白5AC%人中性粒細胞彈性蛋白酶
다황소류%점단백5AC%인중성립세포탄성단백매
目的 观察茶黄素(TF)各单体在人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)诱导气道黏液高分泌中的作用.方法 采用HNE刺激人肺腺癌细胞A549,导致黏液高分泌,以TF各单体(TF1、TF2、TF3)进行干预.采用MTT法测定各单体对A549细胞的活性影响,确定作用剂量后将A549细胞分为4组进行实验,分别为①对照组:无血清培养基培养;②HNE刺激组:HNE(50 nmol/L)刺激24 h;③TF单体干预组:分别用TF1、TF2、TF3(浓度分别为50、100、200 μg/mL)作用24 h后,再予HNE刺激24 h;④AG1478干预组:先用表皮生长因子受体阻断剂AG1478(5 μmol/L)处理30 min后,再予HNE刺激24 h.测定不同剂量TF1、TF2、TF3作用后黏蛋白(MUC)的变化及TF3(200 μg/mL)作用时间不同(12、24、36 h)后MUC的变化.RT-PCR检测MUC5AC mRNA的变化;ELISA 测定MUC5AC蛋白表达的变化.结果 HNE刺激组的MUC5AC mRNA表达和MUC5AC蛋白含量显著高于对照组(P<0.01);而给予TF1、TF2、TF3预处理后,与HNE刺激组相比,两指标均明显下调(均P<0.01),且呈剂量依赖关系,其中以TF3作用最明显.TF3的作用时间也与MUC5AC的下调呈正相关;而AG1478干预组对黏液的下调作用较TF各组更强(P<0.01). 结论TF各单体虽不能完全抑制炎性黏液的分泌,但可明显降低炎性气道的黏液高分泌状态,以TF3作用最强.
目的 觀察茶黃素(TF)各單體在人中性粒細胞彈性蛋白酶(HNE)誘導氣道黏液高分泌中的作用.方法 採用HNE刺激人肺腺癌細胞A549,導緻黏液高分泌,以TF各單體(TF1、TF2、TF3)進行榦預.採用MTT法測定各單體對A549細胞的活性影響,確定作用劑量後將A549細胞分為4組進行實驗,分彆為①對照組:無血清培養基培養;②HNE刺激組:HNE(50 nmol/L)刺激24 h;③TF單體榦預組:分彆用TF1、TF2、TF3(濃度分彆為50、100、200 μg/mL)作用24 h後,再予HNE刺激24 h;④AG1478榦預組:先用錶皮生長因子受體阻斷劑AG1478(5 μmol/L)處理30 min後,再予HNE刺激24 h.測定不同劑量TF1、TF2、TF3作用後黏蛋白(MUC)的變化及TF3(200 μg/mL)作用時間不同(12、24、36 h)後MUC的變化.RT-PCR檢測MUC5AC mRNA的變化;ELISA 測定MUC5AC蛋白錶達的變化.結果 HNE刺激組的MUC5AC mRNA錶達和MUC5AC蛋白含量顯著高于對照組(P<0.01);而給予TF1、TF2、TF3預處理後,與HNE刺激組相比,兩指標均明顯下調(均P<0.01),且呈劑量依賴關繫,其中以TF3作用最明顯.TF3的作用時間也與MUC5AC的下調呈正相關;而AG1478榦預組對黏液的下調作用較TF各組更彊(P<0.01). 結論TF各單體雖不能完全抑製炎性黏液的分泌,但可明顯降低炎性氣道的黏液高分泌狀態,以TF3作用最彊.
목적 관찰다황소(TF)각단체재인중성립세포탄성단백매(HNE)유도기도점액고분비중적작용.방법 채용HNE자격인폐선암세포A549,도치점액고분비,이TF각단체(TF1、TF2、TF3)진행간예.채용MTT법측정각단체대A549세포적활성영향,학정작용제량후장A549세포분위4조진행실험,분별위①대조조:무혈청배양기배양;②HNE자격조:HNE(50 nmol/L)자격24 h;③TF단체간예조:분별용TF1、TF2、TF3(농도분별위50、100、200 μg/mL)작용24 h후,재여HNE자격24 h;④AG1478간예조:선용표피생장인자수체조단제AG1478(5 μmol/L)처리30 min후,재여HNE자격24 h.측정불동제량TF1、TF2、TF3작용후점단백(MUC)적변화급TF3(200 μg/mL)작용시간불동(12、24、36 h)후MUC적변화.RT-PCR검측MUC5AC mRNA적변화;ELISA 측정MUC5AC단백표체적변화.결과 HNE자격조적MUC5AC mRNA표체화MUC5AC단백함량현저고우대조조(P<0.01);이급여TF1、TF2、TF3예처리후,여HNE자격조상비,량지표균명현하조(균P<0.01),차정제량의뢰관계,기중이TF3작용최명현.TF3적작용시간야여MUC5AC적하조정정상관;이AG1478간예조대점액적하조작용교TF각조경강(P<0.01). 결론TF각단체수불능완전억제염성점액적분비,단가명현강저염성기도적점액고분비상태,이TF3작용최강.