CAJ | 학술논문

以多头带绦虫Tm7重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病早期诊断方法.本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出Tm7基因的全序列,该基因的开放阅读框为207 bp,编码68个氨基酸.将此基因克隆到pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a-Tm7,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物.以纯化后的表达蛋白作为抗原,建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白间接ELISA方法.研究结果表明,Tm7基因在大肠杆菌中成功表达,表达产物为约27 ku的融合表达蛋白,该蛋白能识别羊脑多头蚴病阳性血清.建立的间接ELISA方法,检测敏感性可达93.3％,特异性达94.1％,研究结果表明Tm7重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原.
이다두대조충Tm7중조단백위항원,건립동물다두유병조기진단방법.본연구종양뇌다두유원두절제취총RNA,채용RT-PCR기술수차확증출Tm7기인적전서렬,해기인적개방열독광위207 bp,편마68개안기산.장차기인극륭도pET-32a(+)재체,구건중조표체질립pET-32a-Tm7,경전화대장간균BL21(DE3)후IPTG유도표체,용SDS-PAGE화Western blot검측표체산물.이순화후적표체단백작위항원,건립검측양뇌다두유병항체적중조단백간접ELISA방법.연구결과표명,Tm7기인재대장간균중성공표체,표체산물위약27 ku적융합표체단백,해단백능식별양뇌다두유병양성혈청.건립적간접ELISA방법,검측민감성가체93.3％,특이성체94.1％,연구결과표명Tm7중조단백가작위뇌다두유병적진단항원.