中华神经外科杂志
中華神經外科雜誌
중화신경외과잡지
Chinese Journal of Neurosurgery
2006年
6期
377-379
,共3页
胡卫星%封林森%卢春%唐桂霞%史德志%贾雪梅%李立新%魏栋
鬍衛星%封林森%盧春%唐桂霞%史德誌%賈雪梅%李立新%魏棟
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基因治疗自杀基因%CD::UPRT%逆转录病毒%胶质瘤细胞
基因治療自殺基因%CD::UPRT%逆轉錄病毒%膠質瘤細胞
기인치료자살기인%CD::UPRT%역전록병독%효질류세포
目的研究5-FC/CD::UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6的杀伤效应.方法扩增yCD::UPRT融合基因并构建含yCD::UPRT基因的重组表达载体;载体转染包装细胞PT67,所获重组病毒转染胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;用MTT法检测不同浓度5-FC对CD::UPRT转基因细胞的杀伤效应.结果 PCR法扩增出全长CD::UPRT基因,经测序证实序列正确,重组逆转录病毒表达载体pLXSN-yCD::UPRT经双酶切获目的条带,载体转染包装细胞获重组逆转录病毒(滴度达3.5×106 CFU/ml)并转染C6,经筛选获得转基因阳性克隆C6-yCD::UPRT细胞株,检测显示该细胞株有效表达目的基因.当5-FC终浓度≥10μmol/L时,实验组与对照组的细胞增殖力出现显著差异(P＜0.01),5-FC作用96h后电镜观察到凋亡小体.结论 5-FC/yCD::UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6有明显的杀伤作用.
目的研究5-FC/CD::UPRT聯閤基因治療策略對膠質瘤細胞C6的殺傷效應.方法擴增yCD::UPRT融閤基因併構建含yCD::UPRT基因的重組錶達載體;載體轉染包裝細胞PT67,所穫重組病毒轉染膠質瘤細胞C6,篩選併鑒定暘性轉基因剋隆;用MTT法檢測不同濃度5-FC對CD::UPRT轉基因細胞的殺傷效應.結果 PCR法擴增齣全長CD::UPRT基因,經測序證實序列正確,重組逆轉錄病毒錶達載體pLXSN-yCD::UPRT經雙酶切穫目的條帶,載體轉染包裝細胞穫重組逆轉錄病毒(滴度達3.5×106 CFU/ml)併轉染C6,經篩選穫得轉基因暘性剋隆C6-yCD::UPRT細胞株,檢測顯示該細胞株有效錶達目的基因.噹5-FC終濃度≥10μmol/L時,實驗組與對照組的細胞增殖力齣現顯著差異(P＜0.01),5-FC作用96h後電鏡觀察到凋亡小體.結論 5-FC/yCD::UPRT聯閤基因治療策略對膠質瘤細胞C6有明顯的殺傷作用.
목적연구5-FC/CD::UPRT연합기인치료책략대효질류세포C6적살상효응.방법확증yCD::UPRT융합기인병구건함yCD::UPRT기인적중조표체재체;재체전염포장세포PT67,소획중조병독전염효질류세포C6,사선병감정양성전기인극륭;용MTT법검측불동농도5-FC대CD::UPRT전기인세포적살상효응.결과 PCR법확증출전장CD::UPRT기인,경측서증실서렬정학,중조역전록병독표체재체pLXSN-yCD::UPRT경쌍매절획목적조대,재체전염포장세포획중조역전록병독(적도체3.5×106 CFU/ml)병전염C6,경사선획득전기인양성극륭C6-yCD::UPRT세포주,검측현시해세포주유효표체목적기인.당5-FC종농도≥10μmol/L시,실험조여대조조적세포증식력출현현저차이(P＜0.01),5-FC작용96h후전경관찰도조망소체.결론 5-FC/yCD::UPRT연합기인치료책략대효질류세포C6유명현적살상작용.
