生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2006年
6期
23-26
,共4页
彭其安%张西峰%吴思方%王伟平
彭其安%張西峰%吳思方%王偉平
팽기안%장서봉%오사방%왕위평
同源重组%枯草芽孢杆菌%转酮酶基因
同源重組%枯草芽孢桿菌%轉酮酶基因
동원중조%고초아포간균%전동매기인
采用同源重组法高效构建枯草芽孢杆菌转酮酶(tkt)缺失突变株.以大肠杆菌(E.coli DH5α)质粒pBlUSKM为框架,构建出基于枯草杆菌(B.S104)tkt基因位点的整合载体pb-Trs-n,将此载体重组到Bacillus subtilis 104中,从新霉素抗性平板上挑取转化子,整合载体pb-Trs-n的测序结果与Kunst.F报道的tkt基因高度同源(98.9%).同源重组后,B.S104染色体上的tkt基因(2 004bp)部分与载体pb-Trs-n的neo基因(1 197bp)发生了同源交换,确定了该转化子为枯草芽孢杆菌转酮酶缺失突变株(tkt-,neo),该方法构建枯草芽孢杆菌转酮酶(tkt)缺失突变株是可行的,为D-核糖工程菌的研究奠定了基础.
採用同源重組法高效構建枯草芽孢桿菌轉酮酶(tkt)缺失突變株.以大腸桿菌(E.coli DH5α)質粒pBlUSKM為框架,構建齣基于枯草桿菌(B.S104)tkt基因位點的整閤載體pb-Trs-n,將此載體重組到Bacillus subtilis 104中,從新黴素抗性平闆上挑取轉化子,整閤載體pb-Trs-n的測序結果與Kunst.F報道的tkt基因高度同源(98.9%).同源重組後,B.S104染色體上的tkt基因(2 004bp)部分與載體pb-Trs-n的neo基因(1 197bp)髮生瞭同源交換,確定瞭該轉化子為枯草芽孢桿菌轉酮酶缺失突變株(tkt-,neo),該方法構建枯草芽孢桿菌轉酮酶(tkt)缺失突變株是可行的,為D-覈糖工程菌的研究奠定瞭基礎.
채용동원중조법고효구건고초아포간균전동매(tkt)결실돌변주.이대장간균(E.coli DH5α)질립pBlUSKM위광가,구건출기우고초간균(B.S104)tkt기인위점적정합재체pb-Trs-n,장차재체중조도Bacillus subtilis 104중,종신매소항성평판상도취전화자,정합재체pb-Trs-n적측서결과여Kunst.F보도적tkt기인고도동원(98.9%).동원중조후,B.S104염색체상적tkt기인(2 004bp)부분여재체pb-Trs-n적neo기인(1 197bp)발생료동원교환,학정료해전화자위고초아포간균전동매결실돌변주(tkt-,neo),해방법구건고초아포간균전동매(tkt)결실돌변주시가행적,위D-핵당공정균적연구전정료기출.
