中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
123-129
,共7页
氨%细胞生长过程%代谢%角蛋白细胞
氨%細胞生長過程%代謝%角蛋白細胞
안%세포생장과정%대사%각단백세포
目的 了解人表皮角质细胞培养过程中,氨对细胞生长和代谢的影响.方法 收集3～6岁健康幼儿包皮,以Dispase Ⅱ分离、收集原代细胞,角质化细胞专用无血清培养基(Keratinocyte-SFM)培养.待细胞培养至第4代,更换含不同氨浓度的培养基,考察细胞生长和代谢的变化.结果 氨抑制了细胞的生长,当氨的浓度为9.23 mmol/L时,脉冲培养结束时的活细胞密度(0.84×105个/ml)进一步下降,细胞存活率下降至54.5%;氨对细胞生长的抑制作用遵循二级抑制模型,其模型常数Ka为4.46(mmol/L)2,即当氨的浓度为2.11 mmol/L时,细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50%.当氨浓度从1.23 mmol/L增加到1.73mmol/L,细胞对葡萄糖的得率系数下降了48.0%,葡萄糖的比消耗速率上升了14.8%;与氨浓度为1.23 mmol/L相比,9.23 mmol/L的氨使乳酸对葡萄糖的得率系数增加了12.0%,乳酸的比生成速率增加了53.3%.氨浓度的增加明显改变了细胞的代谢,促进了细胞对葡萄糖的利用,消耗的葡萄糖更倾向于乳酸的生成.当氨浓度为9.23 mmol/L,谷氨酰胺的比消耗速率和氨的比生成速率分别是氨浓度为1.23 mmol/L的20.2%和6.2%.氨抑制了谷氨酰胺的消耗,谷氨酰胺在生成谷氨酸后经过脱氢途径的流量减少,更多地向转氨途径,即低效率的产能途径偏移.结论 在人表皮角质细胞的培养过程中,应尽量减少氨的积累.
目的 瞭解人錶皮角質細胞培養過程中,氨對細胞生長和代謝的影響.方法 收集3～6歲健康幼兒包皮,以Dispase Ⅱ分離、收集原代細胞,角質化細胞專用無血清培養基(Keratinocyte-SFM)培養.待細胞培養至第4代,更換含不同氨濃度的培養基,攷察細胞生長和代謝的變化.結果 氨抑製瞭細胞的生長,噹氨的濃度為9.23 mmol/L時,脈遲培養結束時的活細胞密度(0.84×105箇/ml)進一步下降,細胞存活率下降至54.5%;氨對細胞生長的抑製作用遵循二級抑製模型,其模型常數Ka為4.46(mmol/L)2,即噹氨的濃度為2.11 mmol/L時,細胞的比生長速率下降到最大比生長速率的50%.噹氨濃度從1.23 mmol/L增加到1.73mmol/L,細胞對葡萄糖的得率繫數下降瞭48.0%,葡萄糖的比消耗速率上升瞭14.8%;與氨濃度為1.23 mmol/L相比,9.23 mmol/L的氨使乳痠對葡萄糖的得率繫數增加瞭12.0%,乳痠的比生成速率增加瞭53.3%.氨濃度的增加明顯改變瞭細胞的代謝,促進瞭細胞對葡萄糖的利用,消耗的葡萄糖更傾嚮于乳痠的生成.噹氨濃度為9.23 mmol/L,穀氨酰胺的比消耗速率和氨的比生成速率分彆是氨濃度為1.23 mmol/L的20.2%和6.2%.氨抑製瞭穀氨酰胺的消耗,穀氨酰胺在生成穀氨痠後經過脫氫途徑的流量減少,更多地嚮轉氨途徑,即低效率的產能途徑偏移.結論 在人錶皮角質細胞的培養過程中,應儘量減少氨的積纍.
목적 료해인표피각질세포배양과정중,안대세포생장화대사적영향.방법 수집3～6세건강유인포피,이Dispase Ⅱ분리、수집원대세포,각질화세포전용무혈청배양기(Keratinocyte-SFM)배양.대세포배양지제4대,경환함불동안농도적배양기,고찰세포생장화대사적변화.결과 안억제료세포적생장,당안적농도위9.23 mmol/L시,맥충배양결속시적활세포밀도(0.84×105개/ml)진일보하강,세포존활솔하강지54.5%;안대세포생장적억제작용준순이급억제모형,기모형상수Ka위4.46(mmol/L)2,즉당안적농도위2.11 mmol/L시,세포적비생장속솔하강도최대비생장속솔적50%.당안농도종1.23 mmol/L증가도1.73mmol/L,세포대포도당적득솔계수하강료48.0%,포도당적비소모속솔상승료14.8%;여안농도위1.23 mmol/L상비,9.23 mmol/L적안사유산대포도당적득솔계수증가료12.0%,유산적비생성속솔증가료53.3%.안농도적증가명현개변료세포적대사,촉진료세포대포도당적이용,소모적포도당경경향우유산적생성.당안농도위9.23 mmol/L,곡안선알적비소모속솔화안적비생성속솔분별시안농도위1.23 mmol/L적20.2%화6.2%.안억제료곡안선알적소모,곡안선알재생성곡안산후경과탈경도경적류량감소,경다지향전안도경,즉저효솔적산능도경편이.결론 재인표피각질세포적배양과정중,응진량감소안적적루.
