草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2008年
3期
71-78
,共8页
克氏针茅%ISSR%反应体系%优化
剋氏針茅%ISSR%反應體繫%優化
극씨침모%ISSR%반응체계%우화
采用正交试验与单因素设计相结合的方法.对克氏针茅ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA、Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,确立了适合克氏针茅ISSR分析的优化反应体系.在25 μL反应体系中各反应成分为:模板DNA 50 ng,MgM2+ 1.5 mmol/L.dNTP 0.2 mmol/L,引物0.8μmol/L,Taq DNA聚合酶1U,10×buffer 2.5μL.这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行克氏针茅遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位莫定了技术基础.
採用正交試驗與單因素設計相結閤的方法.對剋氏針茅ISSR-PCR反應體繫中的5種主要因素(模闆DNA、Mg2+、Taq DNA聚閤酶、dNTP及引物)進行優化篩選,確立瞭適閤剋氏針茅ISSR分析的優化反應體繫.在25 μL反應體繫中各反應成分為:模闆DNA 50 ng,MgM2+ 1.5 mmol/L.dNTP 0.2 mmol/L,引物0.8μmol/L,Taq DNA聚閤酶1U,10×buffer 2.5μL.這一體繫的建立為今後利用ISSR技術進行剋氏針茅遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構建和基因定位莫定瞭技術基礎.
채용정교시험여단인소설계상결합적방법.대극씨침모ISSR-PCR반응체계중적5충주요인소(모판DNA、Mg2+、Taq DNA취합매、dNTP급인물)진행우화사선,학립료괄합극씨침모ISSR분석적우화반응체계.재25 μL반응체계중각반응성분위:모판DNA 50 ng,MgM2+ 1.5 mmol/L.dNTP 0.2 mmol/L,인물0.8μmol/L,Taq DNA취합매1U,10×buffer 2.5μL.저일체계적건립위금후이용ISSR기술진행극씨침모유전다양성분석、유전도보구건화기인정위막정료기술기출.
