四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF WEST CHINA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2008年
6期
890-894
,共5页
付译节%杨莉%刘康%袁创%陈县城%魏于全
付譯節%楊莉%劉康%袁創%陳縣城%魏于全
부역절%양리%류강%원창%진현성%위우전
日本血吸虫%Tetraspanins%克隆%融合蛋白%免疫原性
日本血吸蟲%Tetraspanins%剋隆%融閤蛋白%免疫原性
일본혈흡충%Tetraspanins%극륭%융합단백%면역원성
目的 克隆和表达日本血吸虫(中国大陆株)tetraspanins胞外环2编码基因(sj-tsp-2),初步研究其免疫原性.方法 通过全基因合成方式获得目的 基因片段,构建重组质粒pET32a-sj-tsp-2,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,在非变性条件下纯化融合蛋白.结果 通过核苷酸测序证实重组表达质粒构建成功.SDS-PAGE结果表明,融合蛋白和目的 肽段与预计大小基本一致.Western Blotting和ELISA结果说明,该融合蛋白具有良好的免疫原性.免疫定位分析显示,Sj-TSP-2主要在日本血吸虫体被表达.结论 本实验成功克隆和表达了日本血吸虫Sj-tsp-2基因,并纯化获得其融合蛋白,为进行动物保护性实验莫定了基础.
目的 剋隆和錶達日本血吸蟲(中國大陸株)tetraspanins胞外環2編碼基因(sj-tsp-2),初步研究其免疫原性.方法 通過全基因閤成方式穫得目的 基因片段,構建重組質粒pET32a-sj-tsp-2,轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞,經IPTG誘導錶達,在非變性條件下純化融閤蛋白.結果 通過覈苷痠測序證實重組錶達質粒構建成功.SDS-PAGE結果錶明,融閤蛋白和目的 肽段與預計大小基本一緻.Western Blotting和ELISA結果說明,該融閤蛋白具有良好的免疫原性.免疫定位分析顯示,Sj-TSP-2主要在日本血吸蟲體被錶達.結論 本實驗成功剋隆和錶達瞭日本血吸蟲Sj-tsp-2基因,併純化穫得其融閤蛋白,為進行動物保護性實驗莫定瞭基礎.
목적 극륭화표체일본혈흡충(중국대륙주)tetraspanins포외배2편마기인(sj-tsp-2),초보연구기면역원성.방법 통과전기인합성방식획득목적 기인편단,구건중조질립pET32a-sj-tsp-2,전화대장간균BL21(DE3)감수태세포,경IPTG유도표체,재비변성조건하순화융합단백.결과 통과핵감산측서증실중조표체질립구건성공.SDS-PAGE결과표명,융합단백화목적 태단여예계대소기본일치.Western Blotting화ELISA결과설명,해융합단백구유량호적면역원성.면역정위분석현시,Sj-TSP-2주요재일본혈흡충체피표체.결론 본실험성공극륭화표체료일본혈흡충Sj-tsp-2기인,병순화획득기융합단백,위진행동물보호성실험막정료기출.