CAJ | 학술논문

背景:细胞凋亡在椎间盘退变过程中发挥重要作用,而导致细胞凋亡的因素很多,氧化应激是导致细胞凋亡的一个重要因素.目的:从细胞内信号转导水平验证过氧化氢对大鼠髓饮细胞氧化应激损伤的影响.设计、时间及地点:单一样本观察.试验于2008 03/10在山东省创伤骨科研究所完成.材料:p38MAPK特异性阻断刺(SB203580)、JNK特异性阻断剂(SP600125)购自碧云天生物技术有限公司:大鼠椎间盘来自2只新生24 h SD大鼠.方法:原代培养大鼠髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液,随即分为4组:H202组:用0,50.100,200,400,800μmol/L H2O2刺激:对照组:不加刺激的细胞:SB203580+H2O2组:给予特异性p38MAPK阻断剂SB203580预孵育细胞,再给予H2O2刺激:SP600125+H2O2组:给予特异性JNK阻断剂SP600125预孵育细胞,再给予H2O2刺激.上述处理后检测相关指标.主要观察指标:以免疫组织化学检测P-p38和P-JNK的表达情况及表达位置:Western印迹法检测SAPKJJNK、p38MAPK及其磷酸化组分的表达.结果:H2O2能够激活髓核细胞内p38和JNK的活性:SB203580能够有效地抑制p38MAPK的活性,而SP600125则能够有效的抑制JNK的活性;免疫荧光显示P-p38MAPK和P-JNK在细胞质和细胞核均有表达中,而对照组未发现.结论:大鼠髓核细胞受氧化应激后可通过p38MAPK和JNK通路导致细胞凋亡.
배경:세포조망재추간반퇴변과정중발휘중요작용,이도치세포조망적인소흔다,양화응격시도치세포조망적일개중요인소.목적:종세포내신호전도수평험증과양화경대대서수음세포양화응격손상적영향.설계、시간급지점:단일양본관찰.시험우2008 03/10재산동성창상골과연구소완성.재료:p38MAPK특이성조단자(SB203580)、JNK특이성조단제(SP600125)구자벽운천생물기술유한공사:대서추간반래자2지신생24 h SD대서.방법:원대배양대서수핵세포,장생장량호적수핵세포제성세포현액,수즉분위4조:H202조:용0,50.100,200,400,800μmol/L H2O2자격:대조조:불가자격적세포:SB203580+H2O2조:급여특이성p38MAPK조단제SB203580예부육세포,재급여H2O2자격:SP600125+H2O2조:급여특이성JNK조단제SP600125예부육세포,재급여H2O2자격.상술처리후검측상관지표.주요관찰지표:이면역조직화학검측P-p38화P-JNK적표체정황급표체위치:Western인적법검측SAPKJJNK、p38MAPK급기린산화조분적표체.결과:H2O2능구격활수핵세포내p38화JNK적활성:SB203580능구유효지억제p38MAPK적활성,이SP600125칙능구유효적억제JNK적활성;면역형광현시P-p38MAPK화P-JNK재세포질화세포핵균유표체중,이대조조미발현.결론:대서수핵세포수양화응격후가통과p38MAPK화JNK통로도치세포조망.