水产科学
水產科學
수산과학
FISHERIES SCIENCE
2011年
9期
575-579
,共5页
孔铖将%史雨红%黎昊雁%陈炯
孔鋮將%史雨紅%黎昊雁%陳炯
공성장%사우홍%려호안%진형
传染性脾肾坏死病毒%DNA聚合酶%超分支滚环扩增%锁式探针
傳染性脾腎壞死病毒%DNA聚閤酶%超分支滾環擴增%鎖式探針
전염성비신배사병독%DNA취합매%초분지곤배확증%쇄식탐침
用超分支滚环扩增法检出传染性脾肾坏死病毒.超分支滚环扩增法包括锁式探针的连接及超分支滚环扩增法扩增两部分,通过研究锁式探针的最佳连接体系和连接条件,并进行超分支滚环扩增法反应条件的优化,得出的本研究最适反应条件为:锁式探针在T4 DNA连接酶作用下37℃连接20 min,接下来的超分支滚环扩增法在Bst DNA聚合酶大片段作用下61℃反应40 min,即能够实现靶序列的有效检出.灵敏度试验表明,超分支滚环扩增法所能检测到的最低模板量接近l copy.在4种病毒中进行的特异性试验表明,本方法能够保证对传染性脾肾坏死病的特异性检测.
用超分支滾環擴增法檢齣傳染性脾腎壞死病毒.超分支滾環擴增法包括鎖式探針的連接及超分支滾環擴增法擴增兩部分,通過研究鎖式探針的最佳連接體繫和連接條件,併進行超分支滾環擴增法反應條件的優化,得齣的本研究最適反應條件為:鎖式探針在T4 DNA連接酶作用下37℃連接20 min,接下來的超分支滾環擴增法在Bst DNA聚閤酶大片段作用下61℃反應40 min,即能夠實現靶序列的有效檢齣.靈敏度試驗錶明,超分支滾環擴增法所能檢測到的最低模闆量接近l copy.在4種病毒中進行的特異性試驗錶明,本方法能夠保證對傳染性脾腎壞死病的特異性檢測.
용초분지곤배확증법검출전염성비신배사병독.초분지곤배확증법포괄쇄식탐침적련접급초분지곤배확증법확증량부분,통과연구쇄식탐침적최가련접체계화련접조건,병진행초분지곤배확증법반응조건적우화,득출적본연구최괄반응조건위:쇄식탐침재T4 DNA련접매작용하37℃련접20 min,접하래적초분지곤배확증법재Bst DNA취합매대편단작용하61℃반응40 min,즉능구실현파서렬적유효검출.령민도시험표명,초분지곤배확증법소능검측도적최저모판량접근l copy.재4충병독중진행적특이성시험표명,본방법능구보증대전염성비신배사병적특이성검측.
