中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
50期
9335-9338
,共4页
易琼%王鲁%李圆方%朱伟
易瓊%王魯%李圓方%硃偉
역경%왕로%리원방%주위
改良型混合酶消化法%乳腺上皮细胞%角蛋白18%细胞培养%小鼠
改良型混閤酶消化法%乳腺上皮細胞%角蛋白18%細胞培養%小鼠
개량형혼합매소화법%유선상피세포%각단백18%세포배양%소서
背景:目前采用的A型胶原酶和胰蛋白酶混合酶分离乳腺细胞团的方法操作复杂,实验条件要求高.目的:观察改良型混合酶消化法能否成功进行乳腺上皮细胞的体外培养.方法:采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶(1∶1∶1)混合消化直接用眼科剪剪碎的小鼠乳腺组织,37 ℃振荡消化获取乳腺细胞团,并采用差速贴壁法去除成纤维细胞,将细胞团接种于细胞培养瓶进行培养.结果与结论:倒置显微镜下观察显示,改良型混合酶消化法能获得较多的细胞团,且培养12 h后细胞团绝大多数贴在细胞瓶壁,培养72 h后细胞团完全铺开融合成片,细胞呈典型的铺路石样.免疫荧光细胞化学染色结果显示,培养细胞角蛋白18呈阳性反应.说明应用改良型混合酶消化法能在短时间内获得大量较纯的乳腺上皮细胞.
揹景:目前採用的A型膠原酶和胰蛋白酶混閤酶分離乳腺細胞糰的方法操作複雜,實驗條件要求高.目的:觀察改良型混閤酶消化法能否成功進行乳腺上皮細胞的體外培養.方法:採用Ⅰ型、Ⅱ型膠原酶和胰蛋白酶(1∶1∶1)混閤消化直接用眼科剪剪碎的小鼠乳腺組織,37 ℃振盪消化穫取乳腺細胞糰,併採用差速貼壁法去除成纖維細胞,將細胞糰接種于細胞培養瓶進行培養.結果與結論:倒置顯微鏡下觀察顯示,改良型混閤酶消化法能穫得較多的細胞糰,且培養12 h後細胞糰絕大多數貼在細胞瓶壁,培養72 h後細胞糰完全鋪開融閤成片,細胞呈典型的鋪路石樣.免疫熒光細胞化學染色結果顯示,培養細胞角蛋白18呈暘性反應.說明應用改良型混閤酶消化法能在短時間內穫得大量較純的乳腺上皮細胞.
배경:목전채용적A형효원매화이단백매혼합매분리유선세포단적방법조작복잡,실험조건요구고.목적:관찰개량형혼합매소화법능부성공진행유선상피세포적체외배양.방법:채용Ⅰ형、Ⅱ형효원매화이단백매(1∶1∶1)혼합소화직접용안과전전쇄적소서유선조직,37 ℃진탕소화획취유선세포단,병채용차속첩벽법거제성섬유세포,장세포단접충우세포배양병진행배양.결과여결론:도치현미경하관찰현시,개량형혼합매소화법능획득교다적세포단,차배양12 h후세포단절대다수첩재세포병벽,배양72 h후세포단완전포개융합성편,세포정전형적포로석양.면역형광세포화학염색결과현시,배양세포각단백18정양성반응.설명응용개량형혼합매소화법능재단시간내획득대량교순적유선상피세포.
