河北医药
河北醫藥
하북의약
HEBEI MEDICAL JOURNAL
2012年
16期
2417-2420
,共4页
潘国强%齐凤平%王相利%徐洪
潘國彊%齊鳳平%王相利%徐洪
반국강%제봉평%왕상리%서홍
骨髓间充质干细胞%神经元样细胞%免疫组化%聚合酶链反应%激光扫描共聚焦显微镜%细胞内游离钙离子
骨髓間充質榦細胞%神經元樣細胞%免疫組化%聚閤酶鏈反應%激光掃描共聚焦顯微鏡%細胞內遊離鈣離子
골수간충질간세포%신경원양세포%면역조화%취합매련반응%격광소묘공취초현미경%세포내유리개리자
目的 观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)按照Woodbury经典诱导方案将其诱导分化为神经元样细胞前后基因方面及Ca2+浓度的变化.方法 分离纯化SD大鼠MSCs进行传代培养,传至第5代时,按照Woodbury经典诱导方案进行诱导,采用免疫组化和Realtime PCR技术检测诱导前后GAP-43、NSE、NF和Nestin 的蛋白和mRNA表达的变化,采用激光扫描共聚焦显微镜检测诱导前后细胞内游离钙离子浓度的变化.结果 诱导后GAP-43、NSE、NF和Nestin蛋白表达水平均有增高(P<0.05),但GAP-43、NSE、NF和Nestin基因表达改变不显著(P>0.05),更换诱导液后,细胞内荧光强度逐渐增加,到100s 达高峰值,其后逐渐减弱,但20 min 时细胞荧光强度仍高于诱导前.结论 MSCs诱导分化为神经元样细胞后GAP-43、NSE、NF和Nestin蛋白表达水平均有增高,但基因表达改变不显著,说明Woodbury经典诱导方案可能为转录后水平即蛋白水平的调控,游离钙离子可能对诱导分化有促进作用.
目的 觀察骨髓間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)按照Woodbury經典誘導方案將其誘導分化為神經元樣細胞前後基因方麵及Ca2+濃度的變化.方法 分離純化SD大鼠MSCs進行傳代培養,傳至第5代時,按照Woodbury經典誘導方案進行誘導,採用免疫組化和Realtime PCR技術檢測誘導前後GAP-43、NSE、NF和Nestin 的蛋白和mRNA錶達的變化,採用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測誘導前後細胞內遊離鈣離子濃度的變化.結果 誘導後GAP-43、NSE、NF和Nestin蛋白錶達水平均有增高(P<0.05),但GAP-43、NSE、NF和Nestin基因錶達改變不顯著(P>0.05),更換誘導液後,細胞內熒光彊度逐漸增加,到100s 達高峰值,其後逐漸減弱,但20 min 時細胞熒光彊度仍高于誘導前.結論 MSCs誘導分化為神經元樣細胞後GAP-43、NSE、NF和Nestin蛋白錶達水平均有增高,但基因錶達改變不顯著,說明Woodbury經典誘導方案可能為轉錄後水平即蛋白水平的調控,遊離鈣離子可能對誘導分化有促進作用.
목적 관찰골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)안조Woodbury경전유도방안장기유도분화위신경원양세포전후기인방면급Ca2+농도적변화.방법 분리순화SD대서MSCs진행전대배양,전지제5대시,안조Woodbury경전유도방안진행유도,채용면역조화화Realtime PCR기술검측유도전후GAP-43、NSE、NF화Nestin 적단백화mRNA표체적변화,채용격광소묘공취초현미경검측유도전후세포내유리개리자농도적변화.결과 유도후GAP-43、NSE、NF화Nestin단백표체수평균유증고(P<0.05),단GAP-43、NSE、NF화Nestin기인표체개변불현저(P>0.05),경환유도액후,세포내형광강도축점증가,도100s 체고봉치,기후축점감약,단20 min 시세포형광강도잉고우유도전.결론 MSCs유도분화위신경원양세포후GAP-43、NSE、NF화Nestin단백표체수평균유증고,단기인표체개변불현저,설명Woodbury경전유도방안가능위전록후수평즉단백수평적조공,유리개리자가능대유도분화유촉진작용.
