医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
5期
45-49
,共5页
王美霞%金铭%段瑾%傅晓晴%徐斌
王美霞%金銘%段瑾%傅曉晴%徐斌
왕미하%금명%단근%부효청%서빈
RNA%La自身抗原%33kDa人类囊相关膜蛋白%真核细胞翻译起始因子第三亚单位
RNA%La自身抗原%33kDa人類囊相關膜蛋白%真覈細胞翻譯起始因子第三亞單位
RNA%La자신항원%33kDa인류낭상관막단백%진핵세포번역기시인자제삼아단위
目的 筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP -33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs.方法 根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子；根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs；分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算△△CT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA.结果 荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在；每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过△△CT值的计算找出其中效率最高的一条.结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP - 33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达.
目的 篩選Huh7細胞內La自身抗原、33kDa人類囊相關膜蛋白(hVAP -33)和真覈細胞翻譯起始因子第三亞單位(eIF2Bgamma)的特異性siRNAs.方法 根據Genebank中的序列設計3種基因的特異性引物,在Huh7細胞中通過熒光定量PCR方法檢測上述3種分子；根據siRNA設計原則針對每種基因設計閤成3條siRNAs；分彆將不同序列siRNA轉染Huh7細胞,利用熒光定量PCR方法併計算△△CT值篩選齣針對每種基因抑製效率最高的一條siRNA.結果 熒光定量PCR方法檢測到瞭上述3種分子的存在；每種基因的3條不同siRNA對相應基因具有不同程度的沉默作用,通過△△CT值的計算找齣其中效率最高的一條.結論 Huh7細胞內可以檢測到La自身抗原、hVAP - 33和eIF2Bgamma基因,其特異性siRNAs可以沉默相應基因錶達.
목적 사선Huh7세포내La자신항원、33kDa인류낭상관막단백(hVAP -33)화진핵세포번역기시인자제삼아단위(eIF2Bgamma)적특이성siRNAs.방법 근거Genebank중적서렬설계3충기인적특이성인물,재Huh7세포중통과형광정량PCR방법검측상술3충분자；근거siRNA설계원칙침대매충기인설계합성3조siRNAs；분별장불동서렬siRNA전염Huh7세포,이용형광정량PCR방법병계산△△CT치사선출침대매충기인억제효솔최고적일조siRNA.결과 형광정량PCR방법검측도료상술3충분자적존재；매충기인적3조불동siRNA대상응기인구유불동정도적침묵작용,통과△△CT치적계산조출기중효솔최고적일조.결론 Huh7세포내가이검측도La자신항원、hVAP - 33화eIF2Bgamma기인,기특이성siRNAs가이침묵상응기인표체.
