中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2003年
12期
731-734
,共4页
转化生长因子-β1%肝硬化%胶原
轉化生長因子-β1%肝硬化%膠原
전화생장인자-β1%간경화%효원
目的观察不同活化状态肝星状细胞 (HSC) 对外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)旁分泌刺激的生物学效应作用. 方法原代分离培养大鼠HSC,无包被塑料培养皿上分别培养1、4、7d,细胞处于静止、中间活化与完全活化状态,继以10～500pmol/L TGF-β1温育细胞24h,3H-TdR掺入法测定细胞增殖,western blot法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与I型胶原蛋白表达沉积,3H-脯氨酸掺入与胶原酶消化法测定细胞总胶原的分泌量.100pmol/L TGF-β1温育细胞15～90min,northern blot法检测细胞I型前胶原mRNA的表达水平. 结果 TGF-β1浓度依赖性抑制培养1d HSC的细胞增殖,10～500pmol/L TGF-β1浓度组细胞内3H-TdR掺入率分别为对照组的52.8%～16.8%,与对照组比较,q值为5.44～10.37,P<0.01.但TGF-β1对培养4d与7d的细胞增殖无影响.随细胞活化,HSC基础性α-SMA、I型胶原蛋白与mRNA水平明显增加,而TGF-β1刺激各培养时间HSC以上蛋白与基因的表达.培养1、4、7d HSC基础水平与TGF-β1刺激的总胶原分泌量分别为(804±274)dpm/孔与(1200±708)dpm/孔;(2966±1701)dpm/孔与(6160±1123)dpm/孔;(2580±767)dpm/孔与(4583±1467)dpm/孔,后2组组内比较,t值分别为3.84与2.96,P<0.01或P<0.05.以培养4d HSC的总胶原分泌与α-SMA表达的效应增加较为明显. 结论 TGF-β1明显抑制静止HSC的细胞增殖,对活化状态HSC生长无影响,促进各种活化状态HSC的表型活化与胶原生成,TGF-β1对活化过程中HSC的增殖与胶原生成功能发生岐化.中间活化状态HSC对TGF-β1促表型活化与胶原生成最为明显,可以作为较理想的药理研究细胞模型.
目的觀察不同活化狀態肝星狀細胞 (HSC) 對外源性轉化生長因子-β1(TGF-β1)徬分泌刺激的生物學效應作用. 方法原代分離培養大鼠HSC,無包被塑料培養皿上分彆培養1、4、7d,細胞處于靜止、中間活化與完全活化狀態,繼以10～500pmol/L TGF-β1溫育細胞24h,3H-TdR摻入法測定細胞增殖,western blot法檢測細胞α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)與I型膠原蛋白錶達沉積,3H-脯氨痠摻入與膠原酶消化法測定細胞總膠原的分泌量.100pmol/L TGF-β1溫育細胞15～90min,northern blot法檢測細胞I型前膠原mRNA的錶達水平. 結果 TGF-β1濃度依賴性抑製培養1d HSC的細胞增殖,10～500pmol/L TGF-β1濃度組細胞內3H-TdR摻入率分彆為對照組的52.8%～16.8%,與對照組比較,q值為5.44～10.37,P<0.01.但TGF-β1對培養4d與7d的細胞增殖無影響.隨細胞活化,HSC基礎性α-SMA、I型膠原蛋白與mRNA水平明顯增加,而TGF-β1刺激各培養時間HSC以上蛋白與基因的錶達.培養1、4、7d HSC基礎水平與TGF-β1刺激的總膠原分泌量分彆為(804±274)dpm/孔與(1200±708)dpm/孔;(2966±1701)dpm/孔與(6160±1123)dpm/孔;(2580±767)dpm/孔與(4583±1467)dpm/孔,後2組組內比較,t值分彆為3.84與2.96,P<0.01或P<0.05.以培養4d HSC的總膠原分泌與α-SMA錶達的效應增加較為明顯. 結論 TGF-β1明顯抑製靜止HSC的細胞增殖,對活化狀態HSC生長無影響,促進各種活化狀態HSC的錶型活化與膠原生成,TGF-β1對活化過程中HSC的增殖與膠原生成功能髮生岐化.中間活化狀態HSC對TGF-β1促錶型活化與膠原生成最為明顯,可以作為較理想的藥理研究細胞模型.
목적관찰불동활화상태간성상세포 (HSC) 대외원성전화생장인자-β1(TGF-β1)방분비자격적생물학효응작용. 방법원대분리배양대서HSC,무포피소료배양명상분별배양1、4、7d,세포처우정지、중간활화여완전활화상태,계이10～500pmol/L TGF-β1온육세포24h,3H-TdR참입법측정세포증식,western blot법검측세포α-평활기기동단백(α-SMA)여I형효원단백표체침적,3H-포안산참입여효원매소화법측정세포총효원적분비량.100pmol/L TGF-β1온육세포15～90min,northern blot법검측세포I형전효원mRNA적표체수평. 결과 TGF-β1농도의뢰성억제배양1d HSC적세포증식,10～500pmol/L TGF-β1농도조세포내3H-TdR참입솔분별위대조조적52.8%～16.8%,여대조조비교,q치위5.44～10.37,P<0.01.단TGF-β1대배양4d여7d적세포증식무영향.수세포활화,HSC기출성α-SMA、I형효원단백여mRNA수평명현증가,이TGF-β1자격각배양시간HSC이상단백여기인적표체.배양1、4、7d HSC기출수평여TGF-β1자격적총효원분비량분별위(804±274)dpm/공여(1200±708)dpm/공;(2966±1701)dpm/공여(6160±1123)dpm/공;(2580±767)dpm/공여(4583±1467)dpm/공,후2조조내비교,t치분별위3.84여2.96,P<0.01혹P<0.05.이배양4d HSC적총효원분비여α-SMA표체적효응증가교위명현. 결론 TGF-β1명현억제정지HSC적세포증식,대활화상태HSC생장무영향,촉진각충활화상태HSC적표형활화여효원생성,TGF-β1대활화과정중HSC적증식여효원생성공능발생기화.중간활화상태HSC대TGF-β1촉표형활화여효원생성최위명현,가이작위교이상적약리연구세포모형.
