中华肾脏病杂志
中華腎髒病雜誌
중화신장병잡지
2006年
8期
483-487
,共5页
王湘玲%陈楠%俞海瑾%王伟铭%倪莉燕
王湘玲%陳楠%俞海瑾%王偉銘%倪莉燕
왕상령%진남%유해근%왕위명%예리연
抗中性粒细胞胞浆抗体%血管炎%凋亡%受体,FC%免疫球蛋白G
抗中性粒細胞胞漿抗體%血管炎%凋亡%受體,FC%免疫毬蛋白G
항중성립세포포장항체%혈관염%조망%수체,FC%면역구단백G
目的 利用阻断IgG-FcγR结合的短肽,观察FcγR在抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)促进中性粒细胞凋亡过程中的作用.方法 人工合成短肽tg9320并鉴定其与人IgG的结合,玫瑰花环形成试验鉴定其阻断IgG-FcγR间的作用.提纯ANCA IgG并鉴定,体外分离健康人中性粒细胞.tg19320预处理经TNF-α预激的粒细胞1.5 h后,ANCA(200μg/ml)刺激粒细胞,分别在3、6、9、12和18 h收获细胞.流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位及凋亡细胞之SubG1峰变化,结合DNA缺口末端标记技术观察tg19320对ANCA促进中性粒细胞凋亡的抑制作用.结果 (1)tg19320剂量依赖性与人IgG结合(P＜0.01),并显著阻断IgG与FcγR的相互作用(玫瑰花环形成率20.3%比53.2%,P＜0.01).(2)正常粒细胞凋亡率随孵育时间增加,TNF-α在6 h前促进粒细胞凋亡而之后抑制粒细胞的凋亡;ANCA进行性促进经TNF-α预处理的粒细胞凋亡(P＜0.01).tg19320处理组粒细胞凋亡率在各时间点均低于ANCA作用组(P＜0.01),而与正常对照组比较无显著差异.结论 分支短肽tg19320可干预ANCA对中性粒细胞凋亡的促进,FcγR在ANCA促进中性粒细胞凋亡过程中具有关键作用.
目的 利用阻斷IgG-FcγR結閤的短肽,觀察FcγR在抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)促進中性粒細胞凋亡過程中的作用.方法 人工閤成短肽tg9320併鑒定其與人IgG的結閤,玫瑰花環形成試驗鑒定其阻斷IgG-FcγR間的作用.提純ANCA IgG併鑒定,體外分離健康人中性粒細胞.tg19320預處理經TNF-α預激的粒細胞1.5 h後,ANCA(200μg/ml)刺激粒細胞,分彆在3、6、9、12和18 h收穫細胞.流式細胞儀檢測細胞線粒體膜電位及凋亡細胞之SubG1峰變化,結閤DNA缺口末耑標記技術觀察tg19320對ANCA促進中性粒細胞凋亡的抑製作用.結果 (1)tg19320劑量依賴性與人IgG結閤(P＜0.01),併顯著阻斷IgG與FcγR的相互作用(玫瑰花環形成率20.3%比53.2%,P＜0.01).(2)正常粒細胞凋亡率隨孵育時間增加,TNF-α在6 h前促進粒細胞凋亡而之後抑製粒細胞的凋亡;ANCA進行性促進經TNF-α預處理的粒細胞凋亡(P＜0.01).tg19320處理組粒細胞凋亡率在各時間點均低于ANCA作用組(P＜0.01),而與正常對照組比較無顯著差異.結論 分支短肽tg19320可榦預ANCA對中性粒細胞凋亡的促進,FcγR在ANCA促進中性粒細胞凋亡過程中具有關鍵作用.
목적 이용조단IgG-FcγR결합적단태,관찰FcγR재항중성립세포포장항체(ANCA)촉진중성립세포조망과정중적작용.방법 인공합성단태tg9320병감정기여인IgG적결합,매괴화배형성시험감정기조단IgG-FcγR간적작용.제순ANCA IgG병감정,체외분리건강인중성립세포.tg19320예처리경TNF-α예격적립세포1.5 h후,ANCA(200μg/ml)자격립세포,분별재3、6、9、12화18 h수획세포.류식세포의검측세포선립체막전위급조망세포지SubG1봉변화,결합DNA결구말단표기기술관찰tg19320대ANCA촉진중성립세포조망적억제작용.결과 (1)tg19320제량의뢰성여인IgG결합(P＜0.01),병현저조단IgG여FcγR적상호작용(매괴화배형성솔20.3%비53.2%,P＜0.01).(2)정상립세포조망솔수부육시간증가,TNF-α재6 h전촉진립세포조망이지후억제립세포적조망;ANCA진행성촉진경TNF-α예처리적립세포조망(P＜0.01).tg19320처리조립세포조망솔재각시간점균저우ANCA작용조(P＜0.01),이여정상대조조비교무현저차이.결론 분지단태tg19320가간예ANCA대중성립세포조망적촉진,FcγR재ANCA촉진중성립세포조망과정중구유관건작용.
