中华消化杂志
中華消化雜誌
중화소화잡지
Chinese Journal of Digestion
2005年
7期
409-412
,共4页
陈颖伟%陈源文%尤汉宁%李定国
陳穎偉%陳源文%尤漢寧%李定國
진영위%진원문%우한저%리정국
腺病毒载体%肝星状细胞%转化生长因子
腺病毒載體%肝星狀細胞%轉化生長因子
선병독재체%간성상세포%전화생장인자
目的研究外源Smad7基因对原代肝星状细胞(HSC)活性和基因表达调控的影响.方法采用胶原酶原位灌注、密度梯度离心法分离SD大鼠原代HSC,并予转化生长因子β1(TGFβ1)刺激,同时分别以重组腺病毒AdSmad7和对照病毒AdGFP感染原代HSC,RT-PCR法检测TGFβ1、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA在HSC中的表达,免疫细胞化学法检测HSC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Smad7表达.结果 RT-PCR显示,与TGFβ1对照组比较,AdSnad7组Smad7 mRNA表达显著上调(P＜0.05),但TGFβ1和Smad3 mRNA表达差异无统计学意义.免疫细胞化学染色显示,与其他各组比较,AdSmad7组HSC胞质中Smad7表达最高,a-SMA表达则明显降低(P＜0.01).结论重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7可在HSC中高效表达;外源Smad7基因可阻断TGFβ1对HSC的活化作用,但对Smad3和TGFβ1mRNA表达无明显影响.
目的研究外源Smad7基因對原代肝星狀細胞(HSC)活性和基因錶達調控的影響.方法採用膠原酶原位灌註、密度梯度離心法分離SD大鼠原代HSC,併予轉化生長因子β1(TGFβ1)刺激,同時分彆以重組腺病毒AdSmad7和對照病毒AdGFP感染原代HSC,RT-PCR法檢測TGFβ1、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA在HSC中的錶達,免疫細胞化學法檢測HSC中α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和Smad7錶達.結果 RT-PCR顯示,與TGFβ1對照組比較,AdSnad7組Smad7 mRNA錶達顯著上調(P＜0.05),但TGFβ1和Smad3 mRNA錶達差異無統計學意義.免疫細胞化學染色顯示,與其他各組比較,AdSmad7組HSC胞質中Smad7錶達最高,a-SMA錶達則明顯降低(P＜0.01).結論重組複製缺陷型腺病毒AdSmad7可在HSC中高效錶達;外源Smad7基因可阻斷TGFβ1對HSC的活化作用,但對Smad3和TGFβ1mRNA錶達無明顯影響.
목적연구외원Smad7기인대원대간성상세포(HSC)활성화기인표체조공적영향.방법채용효원매원위관주、밀도제도리심법분리SD대서원대HSC,병여전화생장인자β1(TGFβ1)자격,동시분별이중조선병독AdSmad7화대조병독AdGFP감염원대HSC,RT-PCR법검측TGFβ1、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA재HSC중적표체,면역세포화학법검측HSC중α-평활기기동단백(α-SMA)화Smad7표체.결과 RT-PCR현시,여TGFβ1대조조비교,AdSnad7조Smad7 mRNA표체현저상조(P＜0.05),단TGFβ1화Smad3 mRNA표체차이무통계학의의.면역세포화학염색현시,여기타각조비교,AdSmad7조HSC포질중Smad7표체최고,a-SMA표체칙명현강저(P＜0.01).결론중조복제결함형선병독AdSmad7가재HSC중고효표체;외원Smad7기인가조단TGFβ1대HSC적활화작용,단대Smad3화TGFβ1mRNA표체무명현영향.
