CAJ | 학술논문

目的以蛋白体(proteosomes)佐剂,非共价结合鼠疫F1-V重组蛋白为免疫原,探讨滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的免疫应答和免疫保护效果.方法佐剂与鼠疫F1-Ⅴ重组蛋白为免疫原非共价结合,滴鼻免疫BALB/c小鼠4次后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-Ⅴ的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类,并检测鼻咽、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-Ⅴ的黏液分泌型IgA;并用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化.第4次免疫后7 d,用100 LD50的鼠疫141强毒株进行腹腔攻毒.结果 (1)以蛋白体为佐剂的鼠疫F1-V抗原与单纯的F1-V组相比,蛋白体疫苗组诱导血清IgG、IgA抗体显著升高(P＜0.01),同时蛋白体疫苗组能诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内多个黏膜部位特异性IgA抗体的产生,尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著(P＜0.01);(2)蛋白体疫苗组主要引起IgG1型抗体,主要诱导TH2型免疫反应;(3)蛋白体疫苗组NALT和SP中CD4+/CD8+比值比PBS对照有显著增高(P＜0.01),MLN和PP中CD4+/CD8+比值与PBS对照差异无统计学意义(P＞0.05).(4)小鼠在100 LD50的鼠疫141强毒株腹腔攻毒后鼠疫F1-V重组蛋白组小鼠免疫保护率为0,而蛋白体佐剂疫苗组小鼠免疫保护率为67%.结论以自制的蛋白体为鼠疫F1-V抗原的佐剂滴鼻免疫小鼠,蛋白体不仅提高鼠疫F1-V抗原的系统免疫应答,而且能诱导小鼠呼吸道、消化道和生殖道局部黏膜免疫应答.蛋白体佐剂鼠疫疫苗对100 LD50的鼠疫141强毒株腹腔攻毒具有一定的免疫保护作用,这为鼠疫黏膜疫苗的研制提供候选材料,也为鼠疫黏膜疫苗深入研究奠定了基础.
목적 이단백체(proteosomes)좌제,비공개결합서역F1-V중조단백위면역원,탐토적비면역BALB/c소서후유도적면역응답화면역보호효과.방법 좌제여서역F1-Ⅴ중조단백위면역원비공개결합,적비면역BALB/c소서4차후,채용간접ELISA검측혈청특이성항F1-Ⅴ적IgG화IgA항체급항체아형분류,병검측비인、폐、소장급음도관세액중특이성항F1-Ⅴ적점액분비형IgA;병용류식세포술검측비상관림파조직림파세포、비림파세포、장계막림파결급소장PP결T림파세포표형적변화.제4차면역후7 d,용100 LD50적서역141강독주진행복강공독.결과 (1)이단백체위좌제적서역F1-V항원여단순적F1-V조상비,단백체역묘조유도혈청IgG、IgA항체현저승고(P＜0.01),동시단백체역묘조능유도비인、폐、소장화음도내다개점막부위특이성IgA항체적산생,우기시폐화생식도충승액내항체승고겁위현저(P＜0.01);(2)단백체역묘조주요인기IgG1형항체,주요유도TH2형면역반응;(3)단백체역묘조NALT화SP중CD4+/CD8+비치비PBS대조유현저증고(P＜0.01),MLN화PP중CD4+/CD8+비치여PBS대조차이무통계학의의(P＞0.05).(4)소서재100 LD50적서역141강독주복강공독후서역F1-V중조단백조소서면역보호솔위0,이단백체좌제역묘조소서면역보호솔위67%.결론 이자제적단백체위서역F1-V항원적좌제적비면역소서,단백체불부제고서역F1-V항원적계통면역응답,이차능유도소서호흡도、소화도화생식도국부점막면역응답.단백체좌제서역역묘대100 LD50적서역141강독주복강공독구유일정적면역보호작용,저위서역점막역묘적연제제공후선재료,야위서역점막역묘심입연구전정료기출.