现代中西医结合杂志
現代中西醫結閤雜誌
현대중서의결합잡지
MODERN JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2004年
8期
981-984
,共4页
胡岳山%李杰芬%王剑%高丽%谭宇蕙
鬍嶽山%李傑芬%王劍%高麗%譚宇蕙
호악산%리걸분%왕검%고려%담우혜
RFDD-PCR%基因表达谱%肾虚证%支气管哮喘
RFDD-PCR%基因錶達譜%腎虛證%支氣管哮喘
RFDD-PCR%기인표체보%신허증%지기관효천
目的运用限制性酶切片段差异显示(RFDD-PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法.方法应用RFDD-PCR技术,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血,分离其总RNA,进行DNase I处理、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在其两端连上接头、特异配对于接头的引物来降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3染色、回收差异条带并重新PCR扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析.结果共找到36条差异条带,其中25条能用斑点杂交验证,选取3条测序,结果与基因库比较未发现同源序列.结论 3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因;RFDD-PCR技术不失为构建中医证的相关基因表达谱的一种好方法.
目的運用限製性酶切片段差異顯示(RFDD-PCR)技術初步篩選支氣管哮喘腎虛證的相關基因,以冀探討構建中醫證的相關基因錶達譜的一種研究方法.方法應用RFDD-PCR技術,收集支氣管哮喘腎虛證患者治療前後外週血,分離其總RNA,進行DNase I處理、閤成雙鏈cDNA、TaqI限切酶酶切、在其兩耑連上接頭、特異配對于接頭的引物來降落PCR擴增、變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、AgNO3染色、迴收差異條帶併重新PCR擴增、反嚮斑點雜交、測序、生物信息學分析.結果共找到36條差異條帶,其中25條能用斑點雜交驗證,選取3條測序,結果與基因庫比較未髮現同源序列.結論 3條基因片段可能是與支氣管哮喘腎虛證相關的新基因;RFDD-PCR技術不失為構建中醫證的相關基因錶達譜的一種好方法.
목적운용한제성매절편단차이현시(RFDD-PCR)기술초보사선지기관효천신허증적상관기인,이기탐토구건중의증적상관기인표체보적일충연구방법.방법응용RFDD-PCR기술,수집지기관효천신허증환자치료전후외주혈,분리기총RNA,진행DNase I처리、합성쌍련cDNA、TaqI한절매매절、재기량단련상접두、특이배대우접두적인물래강락PCR확증、변성취병희선알응효전영、AgNO3염색、회수차이조대병중신PCR확증、반향반점잡교、측서、생물신식학분석.결과공조도36조차이조대,기중25조능용반점잡교험증,선취3조측서,결과여기인고비교미발현동원서렬.결론 3조기인편단가능시여지기관효천신허증상관적신기인;RFDD-PCR기술불실위구건중의증적상관기인표체보적일충호방법.
