SARS冠状病毒S蛋白片段2的表达纯化与多克隆抗体的制备
SARS관상병독S단백편단2적표체순화여다극륭항체적제비
Purification of Glutathione S-transferase Fusion Proteins of SARS Coronavirus Spike Protein Fragment 2 and Preparation of Anti-GST-S2 Polyclonal Antibody
  • 万方数据
    中国病毒学 중국병독학
    VIROLOGICA SINICA
    2005年 3期 217-220 ,共4页

    秦莉%吴少庭%王西明%袁仕善%黄达娜%雷民军%潘晖榕%高世同%张仁利%屈伸

    진리%오소정%왕서명%원사선%황체나%뢰민군%반휘용%고세동%장인리%굴신

    SARS%冠状病毒%S蛋白%亲和层析%多克隆抗体 SARS%冠狀病毒%S蛋白%親和層析%多剋隆抗體
    SARS%관상병독%S단백%친화층석%다극륭항체
    采用RT-PCR技术从SARS冠状病毒基因组扩增编码S蛋白的S2基因片段(第2170到2814位碱基),克隆到pMD18-T载体并测序.用限制性内切酶消化后,S2基因亚克隆至表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌JM109,筛选鉴定阳性菌落.扩增培养含pGEX-S2质粒的JM109大肠杆菌,经IPTG诱导,超声破菌,GSH-Sepharose亲和层析纯化目的蛋白,Western-blot检测SARS患者血清可以识别纯化的蛋白.用此蛋白免疫NIH小鼠,获得了高滴度抗GST-S2抗体的血清,为进一步研究SARS冠状病毒的亚单位疫苗奠定基础.
    채용RT-PCR기술종SARS관상병독기인조확증편마S단백적S2기인편단(제2170도2814위감기),극륭도pMD18-T재체병측서.용한제성내절매소화후,S2기인아극륭지표체재체pGEX-4T-2,전화대장간균JM109,사선감정양성균락.확증배양함pGEX-S2질립적JM109대장간균,경IPTG유도,초성파균,GSH-Sepharose친화층석순화목적단백,Western-blot검측SARS환자혈청가이식별순화적단백.용차단백면역NIH소서,획득료고적도항GST-S2항체적혈청,위진일보연구SARS관상병독적아단위역묘전정기출.
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