中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
6期
762-766
,共5页
孙焕%陆付耳%王增四%徐丽君%杨明炜
孫煥%陸付耳%王增四%徐麗君%楊明煒
손환%륙부이%왕증사%서려군%양명위
NIT-1细胞%小檗碱%凋亡
NIT-1細胞%小檗堿%凋亡
NIT-1세포%소벽감%조망
目的 观察小檗碱对高脂高糖诱导后NIT-1胰岛β细胞凋亡的改善情况,探讨小檗碱抗凋亡的分子机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在培养基中加入高糖高脂及小檗碱共同培养24 h后,比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NI T-1胰岛β细胞活力的影响;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR 法检测凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3 mRNA表达水平;免疫荧光法检测caspase-3 表达.结果与正常对照组相比,模型组NIT-1细胞凋亡率明显升高(P <0.01),bcl-2 mRNA表达明显降低(P<0.01),而bax和caspase-3 mRNA表达明显增高(P<0.01),且胞质caspase-3表达增加;与模型组相比,小檗碱组NIT-1细胞凋亡率明显降低(P<0.01),bcl-2 mRNA表达增高(P<0.01),而bax和casp ase-3 mRNA表达降低(P<0.01),小檗碱组胞质caspase-3表达亦降低.结论 小檗碱抑制高糖高脂诱导NIT-1细胞的凋亡可能与其激活bcl-2和抑制bax和c aspase-3的表达有关.
目的 觀察小檗堿對高脂高糖誘導後NIT-1胰島β細胞凋亡的改善情況,探討小檗堿抗凋亡的分子機製.方法 採用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法,在培養基中加入高糖高脂及小檗堿共同培養24 h後,比較不同濃度的小檗堿對體外培養及高糖高脂誘導的NI T-1胰島β細胞活力的影響;AnnexinV/PI雙標記法流式細胞術檢測細胞凋亡情況;RT-PCR 法檢測凋亡相關基因bcl-2、bax和caspase-3 mRNA錶達水平;免疫熒光法檢測caspase-3 錶達.結果與正常對照組相比,模型組NIT-1細胞凋亡率明顯升高(P <0.01),bcl-2 mRNA錶達明顯降低(P<0.01),而bax和caspase-3 mRNA錶達明顯增高(P<0.01),且胞質caspase-3錶達增加;與模型組相比,小檗堿組NIT-1細胞凋亡率明顯降低(P<0.01),bcl-2 mRNA錶達增高(P<0.01),而bax和casp ase-3 mRNA錶達降低(P<0.01),小檗堿組胞質caspase-3錶達亦降低.結論 小檗堿抑製高糖高脂誘導NIT-1細胞的凋亡可能與其激活bcl-2和抑製bax和c aspase-3的錶達有關.
목적 관찰소벽감대고지고당유도후NIT-1이도β세포조망적개선정황,탐토소벽감항조망적분자궤제.방법 채용사갑기우담서람(MTT)비색법,재배양기중가입고당고지급소벽감공동배양24 h후,비교불동농도적소벽감대체외배양급고당고지유도적NI T-1이도β세포활력적영향;AnnexinV/PI쌍표기법류식세포술검측세포조망정황;RT-PCR 법검측조망상관기인bcl-2、bax화caspase-3 mRNA표체수평;면역형광법검측caspase-3 표체.결과여정상대조조상비,모형조NIT-1세포조망솔명현승고(P <0.01),bcl-2 mRNA표체명현강저(P<0.01),이bax화caspase-3 mRNA표체명현증고(P<0.01),차포질caspase-3표체증가;여모형조상비,소벽감조NIT-1세포조망솔명현강저(P<0.01),bcl-2 mRNA표체증고(P<0.01),이bax화casp ase-3 mRNA표체강저(P<0.01),소벽감조포질caspase-3표체역강저.결론 소벽감억제고당고지유도NIT-1세포적조망가능여기격활bcl-2화억제bax화c aspase-3적표체유관.
